徐锦萍
,
何珩
,
徐梦依
,
曲燕华
色谱
建立了用于饲料添加剂阿散酸质量控制的反相高效液相色谱法.采用的色谱条件:Waters Bondapak C_(18)柱(150 mm×4 mm,5 μm)分离,以甲醇-水(用稀磷酸调节pH至2.9) (1∶4,v/v)作流动相,流速1.0 mL/min,紫外检测波长为244 nm.在优化的色谱条件下,阿散酸和掺假物质对氨基苯磺酸在 3 min 内实现了基线分离.阿散酸和对氨基苯磺酸的线性范围均为5～200 mg/L,检出限(S/N=3)分别为0.20 mg/L 和0.15 mg/L.该方法简便快速,适合饲料添加剂阿散酸的分析以及监测对氨基苯磺酸掺假.
关键词:
反相高效液相色谱法
,
阿散酸
,
对氨基苯磺酸
,
掺假物质
,
饲料添加剂
王灼维
,
彭福利
,
王媛
,
童维
,
任艳
,
徐宁志
,
刘斯奇
色谱
膜蛋白质在变性剂作用下能够较充分地溶解.根据这一特点,我们试图在变性剂溶液中采用串联离子交换色谱法分离小鼠肝脏膜蛋白质.将小鼠肝脏膜蛋白质溶解于含有4 mol/L 尿素,20 mmol/L 三羟甲基氨基甲烷(Tris)-盐酸缓冲液(pH 9.0)中,用Q-Sepharose FF和Sephacryl S-200HR树脂组成的色谱柱结合大部分溶解的膜蛋白质,然后采用氯化钠线性梯度洗脱蛋白质,分步收集后采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)进一步分离洗脱组分的蛋白质.利用胶内胰蛋白酶消化技术将SDS-PAGE胶内分离的蛋白质降解为相应的肽段,然后以反相高效液相色谱分离和离子阱质谱仪鉴定肽段.根据文献报道和蛋白质的功能分类,在所鉴定的392个蛋白质中有306个可能为膜蛋白质或膜结合蛋白质.蛋白质的疏水性计算表明,GRAVY(grand average of hydropathicity)得分大于或等于0.00的蛋白质有83个.综上所述,我们有理由认为本实验方法基本符合小鼠肝脏膜蛋白质组学研究的要求.
关键词:
多维离子交换色谱
,
十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳
,
反相高效液相色谱
,
串联质谱
,
膜蛋白质
,
小鼠肝脏
赵燕燕
,
刘丽艳
,
韩媛媛
,
李月秋
,
王艳
,
石敏健
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2013.03004
建立了同时测定甘草酸单铵盐原料药中主成分18α-甘草酸、18β-甘草酸及其有关物质A、有关物质B含量的高效液相色谱法,并川于其质量标准的建立 采用Durashell C18色潜柱(250 mm ×4.6 mm,5μm),以10mmol/L高氯酸铵(氨水调节pH 8.20)-甲醇(48∶52,v/v)为流动相,流速0.80 mL/min,检测波长 254 nm,柱温50℃,进样量10 μL.在优化的色谱条件下,18α-甘草酸、18β-甘草酸、有关物质A、有关物质B在0.50～ 100 mg/L范围内线性关系良好(r＞0.9999),检出限分别为0.15、0.10、0.10、0.15 mg/L,平均回收率在97.32％～99.33％之间(n=3),相对标准偏差(RSD)在0.05％ ～1.06％之间.本方法检测灵敏、重现性好,结果准确可靠,可川于甘草酸单铵盐原料药主成分及有关物质的检测分析,有利于其原料药的质量控制.
关键词:
反相高效液相色谱法
,
甘草酸单铵盐
,
主成分
,
有关物质
,
原料药
罗安
,
万强
,
范华均
,
陈智
,
吴学昊
,
黄晓文
,
臧林泉
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2014.06026
采用纤维素-三(4-甲基苯甲酸酯)(CTMB)手性固定相,利用反相色谱法研究了氟比洛芬、普拉洛芬、布洛芬、萘普生、洛索洛芬5种芳基丙酸类手性药物的色谱拆分行为.考察了流动相组成、酸碱添加剂及柱温对上述5种药物对映体分离的影响,并通过热力学研究及对映体结构分析对CTMB固定相的手性拆分机理进行了探讨.结果表明,除萘普生采用乙腈-0.1％ (v/v)甲酸溶液外,以甲醇-0.1％ (v/v)甲酸水溶液为流动相可使普拉洛芬、洛索洛芬、氟比洛芬和布洛芬的对映体间的分离度均大于1.5,CTMB固定相对这5种芳基丙酸类药物的手性拆分能力依次为普拉洛芬＞洛索洛芬＞氟比洛芬＞布洛芬＞萘普生.在各自的优化色谱条件下,将方法应用于上述5种药物制剂的含量测定,结果令人满意.
关键词:
反相高效液相色谱法
,
纤维素-三(4-甲基苯甲酸酯)
,
手性固定相
,
芳基丙酸类药物
,
手性拆分
项洋洋
,
俞慧敏
,
邓海山
,
陈静雅
,
张爱华
,
池玉梅
,
韩疏影
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2016.10044
构建了定量结构-保留关系(QSRR)测定马兜铃酸A、马兜铃酸B、马兜铃内酰胺及白黎芦醇的正辛醇-水分配系数(Kow).采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)法,以甲醇-水为流动相,以16种已知Kow值的酸性和中性苯系物为模型化合物,以保留时间两点校正法(DP-RTC)校正保留时间,并由Snyder-Soczewinski方程得100%水相保留因子kw,建立了表观正辛醇-水分配系数Kow″与kw的定量关系(QSRR模型),并对模型进行了内、外部验证.结果显示,不同pH下的QSRR模型线性相关性良好(相关系数R2为0.980~0.987),内部验证(交叉验证相关系数R2cv为0.982~0.988)和外部验证结果(6种验证化合物的相对误差RE为0.6%~10.9%)令人满意.将建立的QSRR模型应用于中药中4种潜在肝肾毒性化合物的Kow测定,并与软件计算值、摇瓶法(SFM)实验值比较,结果显示该方法准确性更高,且简单快捷.该文提出的采用中性及酸性苯系物建立QSRR模型,通过对结构与性质相似的中药材组分进行RP-HPLC分析,得到各待测组分的保留时间即可获得其Kow值的简便策略,解决了中药组分复杂且难以分离、无法通过SFM测定其Kow值的问题,为通过定量-构效关系(QSAR)模型实现快速预测中药组分的肝肾毒性提供了可靠的Kow数据.
关键词:
反相高效液相色谱
,
摇瓶法
,
定量结构-保留关系
,
正辛醇-水分配系数
,
马兜铃酸
,
白黎芦醇
郑振
,
陈秀娟
,
赵亮
,
李武宏
,
洪战英
,
柴逸峰
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2016.09048
建立了新型抗抑郁药米那普仑在环糊精手性固定相上的高效液相色谱拆分方法.在反相色谱条件下采用未衍生化β-环糊精(Cyclobond I 2000)、乙酰基-β-环糊精(AC-β-CD)、2,3-二甲基-β-环糊精(DM-β-CD)、3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯-β-环糊精(DMP-β-CD)4种手性柱分离米那普仑对映体.考察了固定相、流动相比例、pH、流速和柱温对拆分的影响.利用分子对接和结合能计算方法,研究米那普仑分子与AC-β-CD的对接过程,探讨其可能的分离机制.优化后的拆分条件如下:固定相为乙酰基-β-环糊精手性柱Astec CYCLOBOND? I 2000 AC (25 cm×4.6 mm, 5 μm),流动相为乙腈-0.1%(体积分数)pH 5.0醋酸三乙胺溶液(TEAA)(5∶95, v/v),流速为0.4 mL/min,柱温为25 ℃,检测波长为220 nm.在此条件下,米那普仑对映体获得快速拆分,分离度(Rs)为1.74,理论塔板数为 10 125.分子模拟结果表明引起手性识别的作用力主要是环糊精衍生化的乙酰基导致的氢键作用差异.该方法快速、高效、重现性好.
关键词:
反相高效液相色谱法
,
β-环糊精类手性固定相
,
米那普仑
,
手性拆分
,
分离机制
王荔
,
林碧蓉
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2016.10037
采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)-脉冲电化学检测(PED)法测定了重组人生长激素(rhGH)中的诱导剂异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG).rhGH样品经超滤离心后,用超纯水提取,经C18色谱柱分离,用脉冲电化学器检测.结果表明,样品中添加0.02~0.10 mg/L 的IPTG,其回收率为100%~102%,相对标准偏差(n=3)小于10%.在优化的条件下,IPTG的检出限可达1 μg/L(0.1 pmol, 25 μL).该方法简便高效,具有良好的灵敏度、回收率和重复性.
关键词:
反相高效液相色谱法
,
脉冲电化学检测
,
巯基
,
含硫化学物
,
异丙基-β-D-硫代半乳糖苷
,
重组人生长激素
梁超
,
乔俊琴
,
韩艺源
,
练鸿振
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2016.09002
通过反相高效液相色谱法系统地考祭了中性和弱酸性化台物在新型胆固醇基键台相色谱柱(Cholester柱)上的保留行为.以甲醇和乙腈为有机调节剂,建立了保留因子(k)与有机调节剂比例((ψ))间的关系,并外推获取100％水相为流动相时的log kw;同时进一步建立并验证了不同流动相下正辛醇/水分配系数的对数(log Kow)和log kψ(logkw)间的模型,并预测了部分化合物的log Kow.结果表明,使用Cholester柱测定log Kow时,甲醇比乙腈更适合作为有机调节剂;对中性化合物和中性状态的酸性化合物,可以用任意甲醇比例下获取的logk(ψ)预测logKow;对存在离解的酸性化合物,依然用外推方式获取的log kw预测log Kow.将采用Cholester柱与文献中采用C18柱、C8柱建立的log Kow-logkψ模型进行对比,结果表明化合物与胆固醇基键合相存在特别的作用.
关键词:
反相高效液相色谱
,
胆固醇基键合相色谱柱
,
正辛醇/水分配系数
