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基于大体积循环进样的低丰度蛋白质富集

张权青 , 张磊 , 高小迪 , 张维冰 , 张庆合

色谱 doi:10.3724/SP.J.1123.2014.09019

发展了一种大体积循环进样方法,用于富集低丰度蛋白质。在优化的色谱分离条件下,通过增加蛋白质样品的上样体积提高低丰度蛋白质的绝对含量;进一步采用增加样品进样循环次数的方法提高蛋白质的富集效率。以猪肝提取蛋白质为样品,每次上样量500μL 的大体积11次循环进样。根据色谱峰的信号强弱,选择了在原始谱图中看不到色谱峰、有较少小峰和有较多小峰出现的时间段等有代表性的馏分进行研究。在中等极性的组分中,保留时间为11.38 min 和12.58 min 组分的富集效率分别提高了52倍和61倍,实验结果与理论富集效率相近。所发展的方法为生物蛋白质样品研究提供了一种新的富集制备及检测方法。

关键词: 大体积进样 , 循环 , 蛋白质 , 低丰度 , 猪肝 , 富集

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