王定颖
,
朱靖博
,
丁燕
,
寇自农
,
杨兰苹
色谱
中药提取物是一个组成复杂、机理不明晰的混合物体系，其对靶标的作用是其中所有化合物的综合影响，如何表征和评价其生物活性值得深入研究。本文采用羟丙基葡聚糖凝胶色谱柱分离西青果乙醇提取物，得到29组成分连续变化的样品，采集样品的色谱信息（254 nm 波长下）与活性信息，运用逐步回归法建立成分的峰面积（ Vi，自变量）与活性（以对酶的抑制率（W）表示，因变量）之间的数学方程，确定对活性影响显著的成分。结果表明，29组样品包含55个峰，这些峰对应成分的峰面积（ Vi，i ＝1，2，…，55）与 W 之间存在数学关系：W ＝ V7×（-0.034±0.013）＋V18×（-0.155±0.051）＋V29×（-0.142±0.028）＋V4×（0.079±0.020）＋V11×（0.074±0.028）＋V36×（-0.117±0.053）＋85.669±4.476，复相关系数 R ＝0.854，显著度＝0.037，稳健性良好，对活性影响最显著的物质为第18、29、36、4、11和7号峰对应的化合物。该方法同样适用于不同中药资源的成分与多种不同活性等方面的研究，对于中药的研发具有重要意义。
关键词:
高效液相色谱
,
逐步回归分析
,
多元线性回归方程
,
数学模型
,
α-葡萄糖苷酶
,
活性
,
抑制
,
西青果
朱程云
,
魏杰
,
董雪芳
,
郭志谋
,
刘名扬
,
梁鑫淼
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2014.01016
孔雀石绿（MG）和结晶紫（CV）具有抗菌等活性，常被违法用于水产养殖业。但 MG、CV 及其代谢产物隐色孔雀石绿（LMG）、隐色结晶紫（LCV）具有致癌性。所以水产品中染料的残留检测是食品安全分析的重要问题。由于水产品基质复杂，样品前处理尤为重要。本文发展了一种基于 QuEChERS 技术与高效液相色谱联用的方法，用于鱼肉中4种染料的同时检测。对 QuEChERS 方法中提取剂体积、提取次数以及分散固相萃取材料进行了优化。结果表明反相/强阴离子交换材料（C18SAX）能有效提高回收率。在最优条件下，4种染料在0.5~100 mg / L 范围内线性良好，相关系数均大于0.998。该方法在鱼肉中的回收率为73％~91％，RSD 为0.66％~5.41％。结果表明该方法简单、高效，适合于鱼肉中染料的快速检测。
关键词:
QuEChERS
,
高效液相色谱
,
孔雀石绿
,
隐色孔雀石绿
,
结晶紫
,
隐色结晶紫
,
鱼肉组织
李静
,
郭展辰
,
赵旭
,
马玉花
,
韩萍
,
封顺
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2015.07022
建立了一种高效液相色谱同时测定尿液中4种肾脏病常用药物依那普利、氨苯蝶啶、呋塞米及缬沙坦含量的方法。色谱分离选用 WondaSil C18-WR（150 mm×4.6 mm，5μm）；以10.0 mmol／L乙酸铵溶液（pH 3.90）和乙腈为流动相进行梯度洗脱，流速为1.0 mL／min，于254 nm波长下检测，18 min内实现了4种药物的分离分析。结果表明依那普利、氨苯蝶啶、呋塞米、缬沙坦分别在0.15~300 mg／L、0.05~100 mg／L、0.75~750 mg／L、0.05~100 mg／L范围内线性良好，检出限依次为1.38×10-2、7.67×10-3、3.69×10-2、1.16×10-2 mg／L，平均加标回收率在89.49％~99.20％之间，相对标准偏差（ RSD，n=3）在4.12％~9.44％之间。结果表明该方法样品处理简便、快速，结果准确可靠，为肾脏病患者尿液中的治疗药物浓度监测提供了一种新方法。
关键词:
高效液相色谱法
,
依那普利
,
氨苯蝶啶
,
呋塞米
,
缬沙坦
,
尿液
,
肾脏病
沈军
,
李庚
,
李平
,
杨超
,
刘双燕
,
冈本佳男
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2015.10015
通过对糖单元2-位进行选择性酯化以及6-位保护与去保护，运用区域选择性方法合成了5种新型直链淀粉类衍生物，分别为直链淀粉-2-苯甲酸酯-3-（4-氯苯基氨基甲酸酯）-6-（3，5-二甲基苯基氨基甲酸酯）、直链淀粉-2-苯甲酸酯-3-（4-氯苯基氨基甲酸酯）-6-（3，5-二氯苯基氨基甲酸酯）、直链淀粉-2-苯甲酸酯-3，6-二（4-氯苯基氨基甲酸酯）、直链淀粉-2-（4-氯苯甲酸酯）-3，6-二（3，5-二氯苯基氨基甲酸酯）和直链淀粉-2-（4-氯苯甲酸酯）-3，6-二（环己基氨基甲酸酯），并将其涂覆在氨丙基硅胶表面制备了 HPLC 手性固定相。利用核磁共振-氢谱（1H-NMR）和傅里叶变换红外光谱（ FT-IR）技术对所合成衍生物的结构进行了表征和分析，并用 HPLC 法评价所合成衍生物的手性识别能力。与具有单一取代基直链淀粉类手性固定相的对比分析表明，所合成的新型直链淀粉类手性固定相对于某些对映体具有更为优异的拆分结果。进一步分析表明，2-、3-和6-位取代基的性能和引入位置对直链淀粉衍生物的手性识别能力均有较大的影响。
关键词:
高效液相色谱
,
直链淀粉
,
手性固定相
,
苯甲酸酯
,
苯基氨基甲酸酯
,
对映体拆分
,
手性识别
黄天志
,
王世杰
,
刘秀明
,
刘虹
,
吴沿友
,
罗绪强
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2014.09016
针对植物组织中草酸存在的不同形态，建立了水和稀盐酸作为提取介质的逐级提取方法，获得了水溶态和酸溶态草酸及乙醇酸、乙醛酸、酒石酸、苹果酸、乙酸、柠檬酸、琥珀酸等有机酸。采用 Hypersil ODS（200 mm ×4.6 mm，5μm）色谱柱，以5 mmol／L磷酸二氢钾水溶液（ pH 2.8）作为流动相，在进样量5μL、检测波长210 nm、柱温30℃的条件下，通过分时段控制流速实现了8种有机酸的快速分离，同时去除了盐酸对酸溶态草酸测定的干扰。本方法精确灵敏、回收率高、重复性好，可应用于实际样品的测定分析。
关键词:
逐级提取
,
高效液相色谱
,
有机酸
,
植物
李佳斌
,
周廉淇
,
颜辉
,
李楠楠
,
郝斐然
,
田芳
,
张养军
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2013.11042
建立了金属标记结合高效液相色谱-选择性离子监测质谱（SIM）的蛋白质绝对定量新方法。实验考察了金属标记效率、金属标记的稳定性、标记后肽段的色谱保留和质谱行为、新定量方法的线性范围和准确度。实验结果表明金属标记具有标记效率高，稳定性好，色谱保留行为一致等优点。另外，金属标记-选择离子监测质谱绝对定量方法灵敏度高，其定量限低至1 fmol，线性范围为1~500 fmol，线性范围内 R2值大于0.99，具有良好的线性关系；经过测量，标准肽段的回收率为117.01％，说明该方法具有较高的准确度。将该方法应用于腾冲嗜热菌中烯醇酶蛋白的定量分析，相对标准偏差为5.47％，表明该方法的精密度高。以上结果表明该方法可以用于生物样本中的蛋白质的绝对定量分析，为比较简单的生物样本中蛋白质的绝对定量方法提供了一种新的选择。
关键词:
金属标记
,
高效液相色谱
,
选择离子监测质谱
,
蛋白质
,
绝对定量
李双花
,
冯思
,
陈茵佳
,
李彤
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2013.12031
建立了糖化酶中葡萄糖苷转移酶活性测定的高效液相色谱方法。以麦芽糖为底物，阿卡波糖为抑制剂，在37℃、pH=4．8醋酸缓冲液介质中葡萄糖苷转移酶作用下将麦芽糖转化为三糖。采用 SUGAR SH1011色谱柱（300 mm×8.0 mm，6μm）分离，以0.01 mol/L硫酸水溶液为流动相，流速0.6 mL/min，用示差折光检测器检测测定三糖的转化量，间接测定葡萄糖苷转移酶的活性。对色谱条件、底物浓度、抑制剂用量及培养时间等条件进行了系统考察。在优化的条件下，三糖在0.1~10 g/L范围内线性关系良好（ r=0.9998），葡萄糖苷转移酶活性检出限和定量限分别为0.013 U和0.043 U，6次平行测定的相对标准偏差（ RSD）为0.63％。在优化条件下测定了不同批次糖化酶中葡萄糖苷转移酶的活性，结果良好。该方法操作简便，稳定性高，可用于葡萄糖生产原料糖化酶中葡萄糖苷转移酶活性的测定。
关键词:
高效液相色谱
,
葡萄糖苷转移酶
,
活性
,
三糖
,
糖化酶
张虎
,
沈芒芒
,
童胜强
,
颜继忠
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2014.02023
采用 C18反相色谱柱，以磺丁基醚-β-环糊精（SBE-β-CD）作为手性流动相添加剂，建立了阿卓乳酸对映体的高效液相色谱拆分方法。考察了环糊精衍生物类型、手性添加剂浓度、流动相 pH、流速和柱温对手性分离的影响，同时探讨了高效液相色谱采用磺丁基醚-β-环糊精分离阿卓乳酸对映体的分离机制及包结常数，确定了色谱条件为YMC-Pack ODS-A C18色谱柱（250 mm×4.6 mm，5μm），流动相为含25 mmol / L SBE-β-CD 的0.1 mol / L 磷酸盐缓冲液（pH 2.68）-乙腈（90∶10，v / v），流速为0.6 mL / min，柱温为30℃，紫外检测波长为220 nm。对映体的保留时间分别为26.65和28.28 min，分离度为1.68。本方法分离度好，简便易行，且比使用手性固定相分离更加经济。
关键词:
高效液相色谱
,
手性流动相添加法
,
阿卓乳酸
,
对映体拆分
,
磺丁基醚-β-环糊精
许丽丽
,
任乃林
,
林泽玲
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2014.04038
采用中间体法，先将大黄素配体与γ-[（2，3）-环氧丙氧]丙基三甲氧基硅烷（KH-560）偶联剂反应制备含配体的硅氧烷试剂，然后再与硅胶键合，最终制得大黄素键合硅胶液相色谱固定相（以下简称 ESP）。通过红外光谱、元素分析和热重分析表征固定相的结构。以萘作为溶质探针，甲醇-水（60：40，v / v）为流动相，流速为0.8 mL / min，测得 ESP 柱的柱效。采用传统的反相 C18和苯基柱作参比，将 ESP 应用于系列中性、碱性和酸性芳香族化合物以及实际样品风油精的分离分析，并探讨相关的色谱分离机理。结果表明，配体大黄素被成功地键合到球形硅胶表面，测得配体键合量为0.23 mmol / g，ESP 柱理论塔板数约为19874 N / m。ESP 的偶联剂链和蒽醌环提供了疏水性的结构基础，大黄素配体还能为溶质提供π-π或 p-π、电荷转移、氢键、偶极-偶极等作用点。多位点的协同作用使得 ESP 柱具有独特和优秀的色谱分离选择性，并且无需调节 pH 值，采用简单而廉价的甲醇-水流动相就能实现胺类、酚类等极性样品的基线分离，实验条件简单、方便。
关键词:
高效液相色谱
,
键合硅胶固定相
,
大黄素配体
,
色谱柱
,
制备
,
应用
林小建
,
龚如金
,
李平
,
于建国
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2014.04022
以纤维素-三（3，5-二甲苯基氨基甲酸酯）为手性固定相（Chiralcel OD-H）在高效液相色谱上拆分了氨鲁米特对映体。通过测定氨鲁米特在正己烷/乙醇和正己烷/异丙醇中的溶解度，优选了对样品溶解度大的流动相体系，并考察了流动相添加剂乙醇胺对拆分效果的影响。在此基础上进一步研究了流动相中乙醇含量、柱温和进样量对分离因子、分离度、不对称因子和理论板数的影响，从而确定了最佳的拆分条件：固定相为 Chiralcel OD-H，流动相为正己烷/乙醇/乙醇胺（体积比为30：70：0.1），柱温25℃。本文所得结果可为工业放大提供基础数据。
关键词:
高效液相色谱
,
手性固定相
,
手性拆分
,
氨鲁米特
