郭楠
,
董亮
,
刘景全
,
董志扬
,
钟近艺
,
孔令策
环境化学
doi:10.7524/j.issn.0254-6108.2015.07.2015011402
本文通过密码子优化、高效表达并纯化出三种烷基卤去卤化酶DhaA、DmbA与LinB,评价了它们对芥子气的水解效率,分析并优化了酶促水解过程中需要调控的机制.通过实验,最终确定了活性成分为DhaA,缓冲剂为HEPES-NaOH,助溶剂为丙三醇的芥子气高效生物酶洗消体系,使用高效液相色谱质谱确定该体系的洗消产物为无毒硫二甘醇.酶活实验及对芥子气的消毒效果评价结果表明:该洗消体系对芥子气的最佳水解pH值为8.6,kcat/Km值为9.6s-1mmol·L-1,是国外同类水解酶的1.7倍,水解速率为自然水解速率的320倍,对10 mg·mL-1芥子气的水解率从27.4％提高至93.2％,较好解决了高浓度芥子气高效水解脱毒问题.
关键词:
烷基卤去卤化酶
,
芥子气
,
催化水解
