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N-(6-氨乙基)-5-氯-1-萘磺酰胺在体外对人脂肪间充质干细胞转分化为内皮细胞的影响

翟羽佳 , , 陈嘉 , , 仉红刚 , 张静 , 张秋菊 , 修瑞娟

腐蚀学报(英文) doi:10.3881/j.issn.1000-503X.2011.03.019

目的研究N-(6-氨乙基)-5-氯-1-萘磺酰胺(W7)在体外对人脂肪间充质干细胞(hADSCs)转分化为内皮细胞(EC)的影响。方法"以含40-ng/ml血管内皮生长因子(VEGF)和10-ng/ml碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的干细胞无血清分化培养基进行细胞培养,分为空白对照组(不含W7的分化培养基)和高(30-μmol/L)、中(20-μmol/L)、低(10-μmol/L)剂量W7组。hADSCs加药8-d后,采用流式细胞术(FCM)检测各组EC von Willebrand因子(vWF)和血管选择性钙黏素(VE-Cadherin)表型变化,激光共聚焦显微镜检测钙荧光探针(Fluo-3)标记的细胞内[Ca2+i变化;同时将W7处理后的hADSCs种植在Matrigel胶上,观察细胞成血管能力;采用Western blot技术分析不同浓度药物处理8-d后细胞外调节激酶(ERK)和磷酸化ERK(p-ERK)变化。结果"分化至8-d时,与空白对照组相比,hADSCs转分化后的细胞VE-Cadherin 和vWF表达量随W7浓度降低而显著上升(P<0.01),胞质[Ca2+i显著升高(P<0.01)。W7干预组的培养细胞均有管腔样血管结构形成,空白对照组的细胞无血管管型形成。与空白对照组相比,不同剂量W7干预组间细胞的ERK表达水平差异无统计学意义(P>0.05);随着W7浓度的降低,p-ERK表达水平明显升高(P<0.05)。结论"适当浓度的W7可促进hADSC向EC诱导分化,其机制可能与促进细胞内[Ca2+i增加,激活细胞分化过程中的ERK/MAPK信号通路有关。

关键词: N-(6-氨乙基)-5-氯-1-萘磺酰胺 , human adipose-derived mesenchymal stem cells , endothelial cells , induce differentiation

载VEGF的肝素-PLL纳米颗粒改性表面对抗凝血性及内皮细胞行为的影响?

谭建英 , 刘涛 , 陈俊英 , 黄楠

功能材料 doi:10.3969/j.issn.1001-9731.2016.12.015

利用生物分子间的相互作用制备载 VEGF 的肝素-多聚赖氨酸(PLL)纳米颗粒,将该纳米颗粒固定于多巴胺涂覆的316L不锈钢表面,研究其对表面抗凝血性能以及内皮细胞行为的影响。通过阿辛蓝染色和甲苯胺蓝定量肝素的方法对改性表面的理化性质进行表征;用荧光染色法和扫描电镜观察表面血小板的粘附数量及形态;通过APTT检测不同样品表面的凝血时间;通过荧光染色法和 CCK-8细胞增殖活性检测对改性表面的内皮细胞生长行为进行评价。结果显示,构建的纳米颗粒成功固定于316L 不锈钢表面,改性后的表面具有良好抗凝效果(1 h),且样品体外浸泡0,5和15 d后,依然保持良好的持续抗凝血性;同时,改性后的样品表面内皮细胞数量、形态、活性等生物学行为保持良好,具有明显促内皮再生的潜能。纳米颗粒引入心血管材料表面为其生物功能化提供了一种可行方法。

关键词: 血管内皮生长因子 , 纳米颗粒 , 抗凝 , 内皮细胞

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