杨秦
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刘会雪
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李勤
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杨晓达
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王夔
中国稀土学报
应用in-cell和cell free 核磁共振(NMR)方法分别研究了柠檬酸镧与大肠杆菌细胞内15N标记的钙调蛋白(CaM) 以及La3+和大肠杆菌无细胞提取液(Cell free extract, CFE)的相互作用.将所得1H-15N HSQC NMR谱与纯化过的以不同组成比结合Ca/La的CaM的1H-15N HSQC NMR谱比较, 发现在细胞内因胞内环境拥挤, 蛋白运动能力下降, 使CaM 的NMR信号较少且峰宽增加.而柠檬酸镧可以透过细胞膜进入细胞, 并与胞内的CaM结合.无细胞提取液的NMR谱显示, 加镧之前细胞内CaM主要以Ca结合态存在, 而加入La3+可能形成Ca2La2CaM混合金属配合物.这和无细胞的化学体系的实验结果一致.实验结果显示, 细胞水平NMR方法可用于研究稀土以至其他金属配合物与细胞的相互作用如何与细胞内钙调蛋白作用, 以及有关的生物功能.
关键词:
钙调蛋白
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La3+
,
in-cell NMR
,
稀土
李伟国
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赵大庆
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倪嘉缵
应用化学
doi:10.3969/j.issn.1000-0518.2001.09.001
分别研究了钙离子和三价稀土离子对白眉蝮蛇(Agkistrodon blomhoffii Ussurensis)蛇毒磷脂酶A2(PLA 2)活性的影响以及钙调蛋白对它的激活作用.实验结果表明,PLA2的活性对钙离子表现出依赖性,钙调蛋白能够激活该蛇毒PLA2,钙调蛋白的拮抗剂三氟甲基吩噻嗪(Trifluoperazine)能够完全抑制它对PLA2的激活作用.三价稀土离子La3+、Eu3+、Dy3+、Yb3+对该PLA2的活性表现出抑制作用,其中离子半径较大的La3+和Eu3+对酶活的抑制程度要小于半径较小的Dy3+和Yb3+.
关键词:
磷脂酶A2
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钙调蛋白
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稀土离子
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活性
