王骊丽
,
王超展
,
耿信笃
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2011.00036
为了提高重组人干细胞因子(rhSCF)的复性效率,改进了高效疏水相互作用色谱(HPHIC)纯化和复性rhSCF的方法.首先将目标蛋白溶解于8.0 mol/L 脲中,然后将rhSCF包涵体的提取液直接进样到不同规格的HPHIC柱进行纯化和复性.优化了固定相配基结构和流动相组成等实验条件,结果表明,本方法可以快速地获得高质量回收率和高生物活性的rhSCF,rhSCF在40 min内即可完成复性与纯化,目标蛋白的纯度在95.5% 以上,质量回收率高于49.6% .通过体积排阻色谱和基质辅助激光解吸离子化飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)的分析,确认rhSCF以单体存在.结果进一步证明HPHIC法是同时复性和纯化重组蛋白的有效工具.
关键词:
高效疏水相互作用色谱
,
重组人干细胞因子
,
包涵体
