赵睿
,
李新会
,
刘国诠
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2005.06.009
以碱溶法制备的高孔隙度硅胶为基质,与γ-环氧丙基丙氧基三甲氧基硅烷配基进行共价键合,经过酸性水解,使其转化为二醇基,制成了高效亲水凝胶色谱填料.键合反应中采用70 ℃回流冷凝管,使生成的甲醇可顺利地排到体系外,促使反应向有利于键合的方向进行,以获得较高的配基密度.研究表明,水解反应条件与配基密度以及柱效密切相关.当配基密度为2.6～3.5 μmol/m2时,才能显示出较高的柱效.蛋白质分离实验结果显示,此填料的相对分子质量排阻极限为300 000,牛血清白蛋白的回收率为99%.
关键词:
高效凝胶过滤色谱填料
,
高孔隙度硅胶
,
二醇基
,
蛋白质分离
高明霞
,
关霞
,
洪广峰
,
张祥民
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2009.05.005
蛋白质组学出现之后,多维高效液相色谱(multidimensional HPLC,MD-HPLC)系统以其快速、高效、自动化程度高以及容易与质谱等其他技术联用等优势而成为蛋白质组学相关分析技术中研究应用的热点.本文主要以本实验室在蛋白质组学研究中的技术进展为主线,介绍了多维高效液相色谱技术的发展,包括经典的"bottom-up"技术和"top-down"式的多维高效液相色谱技术路线,以及为了提高系统的分离通量而自行设计搭建的阵列式多维高效液相色谱平台,这些技术路线在蛋白质组学研究中有着极大的潜在应用价值.
关键词:
多维液相色谱
,
bottom-up
,
top-down
,
阵列式
,
完整蛋白质
,
蛋白质分离
牛梦娜
,
马红彦
,
胡飞
,
王世革
,
刘璐
,
常海洲
,
黄明贤
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2017.03018
以弱阳离子交换聚合物微球(WCX)为模板、N-三甲氧基硅基丙基-N,N,N-三甲基氯化铵(TMSPTMA)为结构导向剂、四乙氧基硅烷(TEOS)为硅胶前驱体,在三乙醇胺弱碱催化作用下,水解缩合形成有机聚合物与二氧化硅复合微球,将此复合微球煅烧后得到大孔二氧化硅微球.探索了不同反应条件对二氧化硅微球的形貌、表面结构和分散性的影响;当TMSPTMA、TEOS与三乙醇胺的体积比为1:2:2时可以得到孔径在50~150 nm之间、粒径在2 μm左右的硅胶微球.对所制备的大孔硅胶微球表面进行C18(十八烷基二甲基氯硅烷)键合修饰,然后将键合的填料装填到50 mm×4.6 mm的色谱柱中,考察了其对常见的几种标准蛋白质和市售大豆分离蛋白质的分离效果,结果显示这种填料在高效液相色谱蛋白质分离中具有一定的潜力.
关键词:
模板法
,
结构导向剂
,
大孔二氧化硅微球
,
高效液相色谱
,
蛋白质分离
魏芸
,
张天佑
,
张姝
,
刘庆辉
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2001.02.027
以m(质量分数为12.5%的PEG8000)∶m(质量分数为25%的磷酸氢二钾)=1∶1或m(质量分数为12．5%的PEG8000)∶m(质量分数为30%的磷酸氢二钾)=1∶1为溶剂系统，用下相作流动相，上相作固定相，操作时采用500 r/min的转速和60 mL/h的流动相流速，考察了正交轴逆流色谱法对标准蛋白质及羊肚菌糖蛋白和枸杞糖肽的分离情况。将结果与高效液相色谱分离结果相比较，前者在分离度损失不大的基础上提高了进样量，证明了其用于制备的有效性，从而为分离制备天然生物大分子提供了一个新方法。
关键词:
正交轴逆流色谱法
,
蛋白质分离
,
糖蛋白纯化
朱金霞
,
卜春苗
,
龚波林
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2006.02.005
采用分散聚合法制备小颗粒种子及"一步种子溶胀聚合"法成功地制备了粒径为3.0 μm的无孔单分散亲水性交联聚甲基丙烯酸环氧丙酯树脂,其表面经水解、环氧化、再水解后与氯磺酸反应,制备了一种新型的强阳离子交换色谱填料(SCX).详细考察了该填料对标准蛋白质的分离性能及流动相中盐的种类、有机溶剂、流速等对蛋白质保留的影响.实验结果表明,在流速为4 mL/min时,采用线性梯度洗脱,1.0 min内可快速分离4种标准蛋白质,蛋白质的保留符合阳离子交换色谱规律.将SCX应用于快速纯化鸡蛋清中的溶菌酶和猪心中的细胞色素-C,取得了较好的效果.
关键词:
无孔单分散亲水性聚合物微球
,
强阳离子交换色谱
,
蛋白质分离
