张宇
,
秦洪强
,
吴仁安
,
邹汉法
色谱
结合基质辅助激光解吸飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)检测技术,考察了Ti-SBA-15介孔材料对β-酪蛋白酶解产物中磷酸化肽的选择性富集性能.实验结果显示,含Ti和Si物质的量比为0.08的Ti-SBA-15介孔材料可选择性地对β-酪蛋白酶解产物中的磷酸化肽进行选择性富集;对于β-酪蛋白和牛血清白蛋白物质的量比为1∶100的蛋白质酶解混合液,Ti-SBA-15仍能实现对其磷酸化肽的有效富集.上述结果表明,作为一种多孔、高比表面积的磷酸化多肽的选择性吸附材料,Ti-SBA-15有望在磷酸化蛋白质组的分析中得到广泛的应用.
关键词:
Ti-SBA-15介孔材料
,
磷酸化肽
,
选择性富集
,
基质辅助激光解吸飞行时间质谱
翟贵金
,
吴魁
,
汪福意
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2016.08037
血清中磷酸化肽种类和浓度的变化既能反映人体内蛋白质水解酶活性的变化,又能反映蛋白质翻译后磷酸化的水平,业已成为肿瘤标志物寻找和发现的重要目标.因而,血清中磷酸化肽的鉴定及其定量分析在具有临床应用价值的肿瘤标志物的筛选与发现中起着重要作用.由于血清中的内源性磷酸化肽丰度极低,在质谱分析中的离子化效率不高,且受到来自高丰度非磷酸化肽和蛋白质的信号抑制及干扰,血清中磷酸化肽的质谱定量分析是分析化学研究中的一个巨大挑战.文章对血清磷酸化肽的分离富集、质谱定量分析及其作为肿瘤标志物的筛选和评价等3个方面的研究进展进行总结、评述,并展望该领域的未来研究趋势和应用前景.
关键词:
磷酸化肽
,
分离富集
,
质谱定量
,
肿瘤标志物
,
血清
,
综述
邹瑶
,
姜武辉
,
邹丽娟
,
李秀玲
,
梁鑫淼
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2012.11024
目前磷酸化蛋白质组学研究中的主要技术是蛋白质酶解产生的磷酸化肽的质谱检测.但是实际样品中的磷酸化肽(特别是多磷酸化肽)很难被检测到.其原因普遍认为是由于质谱检测时,非磷酸化肽抑制磷酸化肽.但也有认为非磷酸化肽对磷酸化肽没有抑制作用.另外磷酸化肽之间是否存在离子抑制作用还没有报道.本文采用相同氨基酸序列的标准磷酸化肽和非磷酸化肽,将其单独和混合进行质谱检测,通过对比混合前后磷酸化肽的信号强度,证明了非磷酸化肽对磷酸化肽有离子抑制作用；单磷酸化肽对二磷酸化肽有一定的抑制作用,但不太显著；单磷酸化肽对三磷酸化肽、二磷酸化肽对三磷酸化肽均有显著的离子抑制作用.该研究为今后单磷酸化肽和多磷酸化肽的分段富集和检测提供了有力的证明.
关键词:
磷酸化肽
,
质谱
,
离子化抑制
赵艳艳
,
郭志谋
,
李秀玲
,
梁鑫淼
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2013.03003
以标准蛋白质α-酪蛋白的酶解液作为研究对象,考察流动相pH值对磷酸化肽在Click OEG-CD材料上富集选择性的影响.首先以磷酸苯二钠作为模型化合物考察流动相pH值对其在Click OEG-CD材料上的保留影响,结果表明当pH值低于磷酸根的pKa值时,磷酸苯二钠难以电离,与材料的离子交换作用较弱,因而保留也较弱.然后在亲水模式下流动相pH值分别为2,4,6时考察Click OEG-CD材料对α-酪蛋白的酶解液中磷酸化肽的富集选择性影响.结果表明,当流动相pH为2时,磷酸化肽不能被材料富集；当pH为4时,磷酸化肽能够被富集,而且洗脱窗口较窄；当pH为6时,磷酸化肽也能够被富集,但是洗脱窗口较宽.因此适合亲水模式下富集磷酸化肽的流动相pH值为4.本研究结果能够为今后将Click OEG-CD材料更好的应用于磷酸化肽富集提供有意义的借鉴.
关键词:
流动相pH值
,
Click OEG-CD材料
,
磷酸化肽
