李伟国
,
赵大庆
,
倪嘉缵
应用化学
doi:10.3969/j.issn.1000-0518.2001.09.001
分别研究了钙离子和三价稀土离子对白眉蝮蛇(Agkistrodon blomhoffii Ussurensis)蛇毒磷脂酶A2(PLA 2)活性的影响以及钙调蛋白对它的激活作用.实验结果表明,PLA2的活性对钙离子表现出依赖性,钙调蛋白能够激活该蛇毒PLA2,钙调蛋白的拮抗剂三氟甲基吩噻嗪(Trifluoperazine)能够完全抑制它对PLA2的激活作用.三价稀土离子La3+、Eu3+、Dy3+、Yb3+对该PLA2的活性表现出抑制作用,其中离子半径较大的La3+和Eu3+对酶活的抑制程度要小于半径较小的Dy3+和Yb3+.
关键词:
磷脂酶A2
,
钙调蛋白
,
稀土离子
,
活性
刘淑清
,
孙明忠
,
赵宝昌
应用化学
doi:10.3969/j.issn.1000-0518.2009.03.003
从旅顺产白眉蝮蛇(Glyodius blomhoffi Brevicaudaus,GBB)蛇毒(GBBSV)中首次纯化得到了电泳纯和质谱纯磷脂酶A2(GBB-PLA2). 采用电泳、质谱、等离子体发射光谱、紫外、荧光光谱测试技术对GBB-PLA2进行了系统表征. HPLC-ESI-MS法测得的精确分子量为13 965.07 amu,HPLC-ESI-MS/MS法鉴定GBB-PLA2为江浙蝮蛇和尖吻蝮蛇蛇毒PLA2的同源性蛋白,分别得到4个和1个同源性肽段. 凝胶过滤、质谱和SDS-PAGE测试技术结果表明,GBB-PLA2以稳定的单体形式存在. 电感耦合等离子体发射光谱分析法(ICP-AES)测得每1个磷脂酶A2含有1个Ca2+离子,Ca2+是PLA2活性所必需的. Ca2+的除去使PLA2活性降低90%,外加Ca2+明显加速PLA2水解底物DPPC的速度. Ca2+起稳定PLA2结构的作用,可使GBB-PLA2的热变性温度提高3 ℃.
关键词:
磷脂酶A2
,
Ca2+离子
,
结构
,
功能
