王云
,
郭敏亮
,
姜守磊
,
陈天
,
姜涌明
,
陈云
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2000.04.020
以交联壳聚糖为基质,正戊醛为配基,利用改进的方法制备了疏水作用色谱(HIC)填料,并对该色谱填料的吸附行为和应用作了研究.结果表明,此类填料对蛋白质的吸附行为符合疏水相互作用理论,对α-淀粉酶的纯化活性回收率大于80%.
关键词:
疏水作用色谱
,
填料
,
壳聚糖
,
蛋白质
赵建国
,
姚丛
,
卫引茂
,
耿信笃
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2001.06.001
首次研究了疏水作用色谱(HIC)中芳香醇同系物在不同种类盐流动相中的保留行为.以计量置换保留模型中的参数Z分析了HIC中小分子与生物大分子保留行为的差别,以及不同流动相组成对两种类型溶质的洗脱范围及洗脱能力的影响.与反相色谱相似,芳香醇在HIC中的保留仍存在同系物规律.比较了小分子和生物大分子在不同盐溶液中的Z值变化,表明流动相中的盐仅改变小分子与固定相的水合程度,而对生物大分子,除改变其和固定相水合程度外,还会影响生物大分子与固定相接触区的分子构象.
关键词:
疏水作用色谱
,
芳香醇同系物
,
生物大分子
,
保留
毕晶
,
白泉
,
王军
,
王骊丽
色谱
采用疏水相互作用色谱(HIC)对还原变性核糖核酸酶A (RNase A)在疏水性液-固界面上的复性进行了研究.详细讨论了流动相中脲的浓度、还原型谷胱甘肽/氧化型谷胱甘肽(GSH/GSSG)的比例、流动相pH和变性蛋白质浓度对还原变性RNase A复性效率和质量回收率的影响.结果表明,在最优化的复性条件(流动相中含有2.0 mol/L 脲,GSH/GSSG的浓度比为8∶1,流动相pH为8.0)下,还原变性RNase A能完全复性.当变性蛋白质质量浓度为5.0 mg/mL 时,还原脲变性RNase A的活性回收率和质量回收率分别为98.0%和61.9% ,还原胍变性RNase A分别为100.1%和66.8% .研究表明HIC是还原变性蛋白质复性的有力工具之一,可为蛋白质复性研究提供新方法和新思路.
关键词:
蛋白质复性
,
疏水作用色谱
,
还原变性
,
核糖核酸酶A
