赵海珍
,
陆兆新
,
别小妹
,
吕凤霞
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2005.02.006
建立了一种采用高效液相色谱法(HPLC)分析猪油甘油三酯中的脂肪酸组成及其位置分布的方法.利用sn-1,3位专一性脂肪酶对甘油三酯sn-1,3位上的脂肪酸进行水解,形成sn-2位甘油单酯和游离脂肪酸;之后,通过甘油三酯中脂肪酸总含量和sn-1,3位上脂肪酸含量之间的差值计算出sn-2位上的脂肪酸含量.利用2-溴苯乙酮仅同游离脂肪酸作用的特点,将脂肪酸酯化为苯乙酰甲酯,然后进行HPLC分析.分析所用色谱柱为ZORBAX SB C18柱,以十七酸作为内标,甲醇-乙腈-水为流动相,采用梯度洗脱(梯度洗脱程序为甲醇-乙腈-水由80∶10∶10(体积比,下同)在35 min内线性变化到86∶10∶4,然后在5 min内恢复到起始比例,流动相流速为1 mL/min),通过测定苯乙酰甲酯在254 nm处的吸光度值来测定脂肪酸含量.结果表明,猪油甘油三酯中的脂肪酸主要是棕榈酸和油酸(分别占总量的26.61%和43.18%),其中油酸主要分布于sn-1,3位上,而棕榈酸分布于sn-2位上.这些测定结果与传统气相色谱法的测定结果相吻合.该方法简单可行,省去了传统测定中费时的薄层色谱分离步骤,可成为一种有效的实验室分析方法.
关键词:
高效液相色谱
,
脂肪酸
,
位置分布
,
甘油三酯
,
脂肪酶
,
猪油
赵海珍
,
陆兆新
,
别小妹
,
吕凤霞
,
刘战民
应用化学
doi:10.3969/j.issn.1000-0518.2006.02.020
研究了脂肪酶催化猪油与辛酸酸解制备功能性脂. 在所选5种脂肪酶中,固定化脂肪酶Liopzyme TL IM的催化效果最好. 研究了加酶量、底物比率、反应时间和反应温度对猪油中辛酸插入率的影响. 用高效液相色谱法(HPLC)进行产物分析. 最终确定2种体系中辛酸插入的条件为:在正己烷体系中,当加酶量为15%,猪油与辛酸摩尔比为1∶ 2,55 ℃反应24 h,辛酸插入率(摩尔分数)为(34.9±1.7)%;无溶剂体系中,加酶量为20%,猪油与辛酸摩尔比为1∶ 2,在50 ℃反应24 h时,辛酸插入率(摩尔分数)为(32.4±2.6)%.
关键词:
猪油
,
酸解
,
固定化脂肪酶
,
辛酸
,
功能性脂