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柱前衍生化反相高效液相色谱法测定板蓝根中的氨基酸

万绍晖 , 杨浩 , 耿秀梅

色谱 doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2005.04.018

建立了板蓝根中指标性成分精氨酸、脯氨酸和谷氨酸的柱前衍生化反相高效液相色谱分析方法.以2,4-二硝基氟苯为衍生化试剂,将氨基酸在碱性条件下衍生化,然后直接进样进行高效液相色谱测定.采用的色谱条件为:色谱柱Sinochrom ODS-BP柱(250 mm×4.6 mm i.d.,5 μm),流动相醋酸钠缓冲溶液(pH 6.4)-乙腈(体积比为850∶150),检测波长360 nm,采用外标法定量.该文同时对谷氨酸、精氨酸和脯氨酸进行定性,并对精氨酸和脯氨酸进行定量.精氨酸和脯氨酸的进样量分别为0.627～5.016 μg和0.874～7.000 μg时,其峰面积与进样量呈良好的线性关系(r分别为0.999 6和0.999 5).精氨酸和脯氨酸的平均回收率分别为98.5% (相对标准偏差(RSD)为2.5% (n=8))和98.4% (RSD为2.3% (n=8)).对板蓝根样品进行了测定,结果表明,板蓝根中精氨酸的含量最高,脯氨酸次之,谷氨酸含量很少.该法简便、准确、可靠,适用于板蓝根药材的质量控制.

关键词: 反相高效液相色谱法 , 柱前衍生化 , 2,4-二硝基氟苯 , 精氨酸 , 脯氨酸 , 谷氨酸 , 板蓝根

溴化衍生气相色谱法测定环境水体中的酚系物

张明时 , 王爱民

色谱 doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2000.01.029

以溴水为衍生化试剂, 使酚系物转化为溴代酚,再以抗坏血酸为稳定剂,用甲苯进行萃取富集,用FFAP大口径石英毛细管柱进行分离.用ECD 检测器气相色谱法测定了环境水体中的酚系物.

关键词: 气相色谱 , 环境水体 , 酚系物 , 柱前衍生化

反相高效液相色谱用于寄生虫中氨基酸含量的测定

商振华 , 蒋晖 , 于亿年 , 刘学良 , 崔昱

色谱 doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2001.04.024

为了对寄生虫病进行有效的防治，采用柱前衍生、反相高效液相色谱分离、紫外吸收定量法对中国7个地区马来丝虫及马来丝虫幼虫氨基酸的组成和含量进行了测定。结果表明：不同地区的马来丝虫中各氨基酸的含量存在着一定的差别，幼虫的氨基酸含量明显低于成虫的相应氨基酸含量。此方法简便、准确，在研究寄生虫的种内分化、种下分类和生长、发育、代谢等生命活动方面具有重要的意义。

关键词: 反相高效液相色谱 , 柱前衍生化 , 氨基酸 , 寄生虫

对一种分离测定氨基酸方法的改进

陈永波 , 程群 , 饶斌 , 覃兰

色谱 doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2001.06.023

对Waters公司采用6-氨基喹啉-N-羟基琥珀酰亚胺基-氨基甲酸酯(AccQ.Tag)柱前衍生化测定氨基酸的方法进行了改进.将流动相流速由原来的1.0 mL/min改变为2.0 mL/min,用AccQ.Tag专用柱(3.9 mm i.d.×150 mm,4 μm)在17.5 min(原为35 min)(运行周期为22.5 min,原为45 min)内快速分离测定了18种氨基酸和牛磺酸.用Nova-Pak C18柱(3.9 mm i.d.×150 mm,4 μm),Nova-Pak C18柱(4.6 mm i.d.×150 mm,4 μm),Symmetry C18柱(3.9 mm i.d.×150 mm,4 μm)和Waters Xterra RP-18柱等反相C18柱代替AccQ.Tag专用柱,均可对氨基酸进行快速分离,其中以Symmetry C18柱分离效果最好,出峰紧凑且峰形对称,分离时间仅14.5 min(运行周期为20.0 min),色谱柱价格比AccQ.Tag专用柱便宜,是AccQ.Tag专用柱最理想的替代品.

关键词: 柱前衍生化 , 6-氨基喹啉-N-羟基琥珀酰亚胺基-氨基甲酸酯 , 快速测定 , 氨基酸 , 牛磺酸

异硫氰酸苯酯柱前衍生化反相高效液相色谱法同时测定18种氨基酸

杨菁 , 孙黎光 , 白秀珍 , 周海涛

色谱 doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2002.04.022

建立了一种利用反相高效液相色谱同时测定18种氨基酸的方法.以正亮氨酸为内标物,异硫氰酸苯酯为柱前衍生剂,用C18色谱柱在柱温38 ℃下采用二元梯度洗脱,于254 nm波长处检测.氨基酸质量浓度在 3.5 mg/L～55.6 mg/L时,其峰面积与内标物峰面积的比值和氨基酸的质量浓度的线性相关系数,除胱氨酸(0.962)外均大于0.99;18种氨基酸的加标回收率在96.0%～102.4%.信噪比为2时,亮氨酸最低检测限为 0.5 mg/L.应用该方法对小牛血去蛋白注射液中的游离氨基酸含量进行了测定,取得了满意的结果.

关键词: 高效液相色谱法 , 柱前衍生化 , 异硫氰酸苯酯 , 正亮氨酸 , 氨基酸

气相色谱-邻苯二甲酸二甲酯内标法同时测定硝基苯酚的三种异构体

王京平

色谱 doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2004.05.026

关键词: 气相色谱法 , 柱前衍生化 , 邻苯二甲酸二甲酯 , 内标法 , 硝基苯酚

高效液相色谱-荧光检测法测定牛奶中氯霉素的残留量

潘莹宇 , 许茜 , 康学军 , 张建新

色谱 doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2005.06.003

建立了对牛奶中氯霉素的残留量进行检测的高效液相色谱-荧光检测方法.氯霉素还原后在温和条件下与荧光胺发生衍生化反应,采用十八烷基键合硅胶固定相,以乙腈/四氢呋喃/0.02 mol/L醋酸钠-醋酸缓冲液(pH 6.0)(体积比为16:8:76)为流动相,流速1.0 mL/min,柱温40 ℃,荧光检测激发波长为410 nm,发射波长为508 nm.在上述实验条件下,氯霉素检测的线性范围为0.4～800 μg/L (r2=0.999 9),检出限为0.2 μg/L.当空白样品中氯霉素添加水平为2～40 μg/L时,该方法的回收率为66.6%～92.8%,相对标准偏差为4.5%～9.4%.该方法适用于牛奶中氯霉素痕量残留的监测,具有干扰小、选择性好、灵敏度高等优点.

关键词: 高效液相色谱-荧光检测法 , 柱前衍生化 , 荧光胺 , 氯霉素 , 残留 , 牛奶

柱前衍生化高效液相色谱法测定固定剂量复方抗结核制剂中盐酸乙胺丁醇的含量和溶出度

孙进 , 宋洪涛 , 张天虹 , 王卓 , 何仲贵

色谱 doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2006.02.013

建立了快速、灵敏和准确的柱前衍生化高效液相色谱测定固定剂量复方抗结核制剂中盐酸乙胺丁醇的含量和溶出度的方法.在无水环境下,盐酸乙胺丁醇与苯乙基异氰酸酯发生柱前衍生化反应的最佳反应的物质的量比为1∶6,检测波长为215 nm.该法成功地用于由4种药物组成的复方抗结核制剂中盐酸乙胺丁醇的含量和溶出度的测定.

关键词: 柱前衍生化 , 高效液相色谱法 , 盐酸乙胺丁醇 , 固定剂量复方制剂

免疫亲和柱净化/柱前衍生化-高效液相色谱荧光检测法测定粮谷中的T-2毒素

李军 , 许烨 , 隋凯 , 卫锋 , 赵守成 , 王玉萍

色谱 doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2006.03.010

建立了免疫亲和柱净化/柱前衍生化-高效液相色谱荧光检测器测定粮谷中T-2毒素含量的方法.样品经甲醇-水(体积比为80∶20)混合溶剂提取,通过免疫亲和柱(IAC)净化,以氰酸蒽(1-AN)为衍生化试剂、4-二甲基氨基吡啶(DMAP)为催化剂进行衍生,以ZORBAX Eclipse XDB-C18 柱为分离柱,乙腈-水(体积比为80∶20)为流动相进行高效液相色谱分离及荧光检测,荧光检测的激发波长为381 nm,发射波长为470 nm.T-2毒素的质量浓度为0.01～1.5 mg/L时与峰高呈良好的线性,相关系数为0.9985.在0.01～1.5 μg/g添加水平下,回收率为79.7% ～94.5% ,相对标准偏差小于7% ;检出限(S/N＝3)为0.01 μg/g.该方法净化效果好,灵敏度高,操作简便快速.

关键词: 免疫亲和柱 , 柱前衍生化 , 高效液相色谱法 , 荧光检测 , T-2毒素 , 粮谷

对氨基苯甲酸衍生化高效液相色谱法分析多糖中的单糖及糖醛酸组成

郝桂堂 , 陈尚卫 , 朱松 , 尹鸿萍 , 戴军 , 曹玉华

色谱 doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2007.01.015

建立了一种柱前对氨基苯甲酸(p-AMBA)衍生反相离子对色谱法同时分离检测多糖中单糖及糖醛酸组成的方法,筛选出适合于p-AMBA糖衍生物分离的色谱柱,考察了流动相组成对9种单糖和两种糖醛酸的p-AMBA衍生化产物的保留值及分离的影响,优化了反应温度和反应时间等衍生化条件,并应用优化的分析方法测定了螺旋藻中的单糖和糖醛酸的组成.采用紫外检测时,方法的检出限为 (2.55～13.4)×10-7mol/L;采用荧光检测时,方法的检出限为(3.38～176)×10-8 mol/L.

关键词: 柱前衍生化 , 高效液相色谱法 , 对氨基苯甲酸 , 单糖 , 糖醛酸 , 多糖