戴军
,
关惠琴
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陈尚卫
,
堵国成
,
陈坚
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2003.06.011
建立了利用高效液相色谱分离分析谷氨酸棒杆菌细胞内尿苷二磷酸(UDP)葡萄糖与UDP半乳糖的新方法,考察了不同色谱柱、不同分离模式及不同流动相组成对UDP葡萄糖和UDP半乳糖的保留特性及分离度的影响.结果表明,在Zorbax NH2柱(250 mm×4.6 mm i.d.,5 μm)上以0.125 mol/L KH2PO4缓冲液(pH 3.6)-乙腈(体积比为40∶60)溶液为流动相,可使谷氨酸棒杆菌细胞内的两种中间代谢产物UDP葡萄糖与UDP半乳糖在22 min内达到基线分离.该方法对UDP葡萄糖和UDP半乳糖的检测限分别为3.2和3.5 ng.UDP葡萄糖和UDP半乳糖样品的平均回收率分别为98.26%和99.02%,相对标准偏差分别为2.71%和3.54%.
关键词:
高效液相色谱法
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尿苷二磷酸葡萄糖
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尿苷二磷酸半乳糖
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谷氨酸棒杆菌