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重组大肠杆菌细胞不对称还原4-氯乙酰乙酸乙酯合成(R)-(+)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯

敬科举 , 徐志南 , 林建平 , 岑沛霖

催化学报

从赭色掷孢酵母(Sporobolomyces salmonicolor ZJU0105)中克隆出NADPH依赖型醛基还原酶基因,构建了重组大肠杆菌E.coli BL21(pET28-ALR0105), 该工程菌可以高效地表达醛基还原酶. 将重组细胞用于催化4-氯乙酰乙酸乙酯不对称还原,合成出具有光学活性的(R)-(+)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯. 实验发现,在加入适量辅酶及辅酶再生酶的条件下,利用重组细胞催化还原反应可以获得比使用赭色掷孢酵母更高的转化率、产率和ee值,得到了几乎是光学纯的(R)-(+)-型产物,从而解决了酵母细胞催化此类反应ee值较低的问题. 考察了辅酶及共底物的添加、底物和产物的浓度、pH值、温度以及菌体密度等因素对还原反应的影响. 结果表明,不对称还原反应必须在辅酶NADPH和辅酶再生酶系及共底物葡萄糖的参与下进行; 底物和高浓度的产物对还原反应有一定的抑制作用; 当pH>6.0时,反应的转化率及产率都显著降低; 高密度重组细胞可以减小底物的抑制作用.

关键词: 重组细胞 , 大肠杆菌 , E.coli BL21(pET28-ALR0105)菌株 , 醛基还原酶 , 生物催化 , 4-氯乙酰乙酸乙酯 , 不对称还原 , (R)-(+)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯

Ag-Ce/AlPO4催化剂在水中催化杀菌的影响因素

常青云 , 贺泓 , 曲久辉 , 赵进才

催化学报

研究了不同实验条件下磷酸铝负载的银-铈催化剂(Ag-Ce/AlPO4)在水中对大肠杆菌(E.coli)的催化杀灭作用.结果表明,催化杀菌效果随初始菌液浓度的增加而减弱,但当初始菌液浓度为5×105 CFU/ml时,120 min内即可使E.coli 100%灭活,可以满足饮用水消毒要求.固定初始菌液浓度后,在室温25~40 ℃时,催化杀菌活性随温度的升高而显著增强.适当调节反应体系的pH值,发现弱碱性条件下催化杀菌活性较高,而强酸性条件下几乎完全没有杀菌活性.结合不同pH值条件下的电子自旋共振光谱测试结果,证明弱碱性条件更有利于强氧化性的·OH 产生,进一步验证了·OH 的生成是催化剂具有高杀菌活性的决定因素.

关键词: 磷酸铝 , , , 负载型催化剂 , 活性氧物种 , 催化杀菌 , 大肠杆菌 , 饮用水

环境因素对细菌附着的影响

张晓 , 段东霞 , 陈西广

材料开发与应用

生物污损是船舶及海洋工程面临的主要问题,其中由细菌附着形成的生物膜难以避免,且具有介导无脊椎污损生物幼虫附着的特性,尤为棘手.因此,控制海洋细菌生物膜的形成成为防污研究的重要课题.本文利用海洋细菌Bacillus subtilis和Escherichia coli设计试验,考察环境因素和基底材料对细菌生物膜形成的影响,揭示细菌生物膜的形成规律.研究结果表明:温度、盐度等环境因素对Bacillus subtilis和Escherichia coli 附着形成生物膜的影响极显著(方差检验结果即P<0.01),通过控制环境因素可以干扰生物膜的形成.

关键词: 枯草芽孢杆菌 , 大肠杆菌 , 附着 , 生物膜

细菌在生物活性钛表面的粘附行为

甘露 , 杨帮成 , 张兴栋

稀有金属材料与工程

以经酸碱处理、碱热处理和阳极氧化处理后的生物活性钛材为研究对象,对材料进行了表面形貌分析和表面能的测定,并选用常见感染细菌金黄色葡萄球菌和大肠杆菌为研究菌株,采用体外共培养法培养,通过SEM对细菌的形态、在材料表面的粘附情况和粘附量进行观察,通过MTT法对细菌粘附量进行半定量测定,综合评价生物活性钛的表面结构对细菌增殖和粘附的影响. 结果表明,在3种生物活性钛材料表面,细菌的粘附和增殖受材料表面形貌影响显著,其中碱热处理钛表面和阳极氧化钛表面不利于细菌的增殖和粘附,显示出较好的抑菌性能.

关键词: 生物活性钛 , 金黄色葡萄球菌 , 大肠杆菌 , 细菌粘附

基于树枝状分子及功能化金纳米粒子的电化学免疫传感器检测污泥中大肠杆菌

鲁文杰 , 张新爱 , 李昌烽 , 申建忠 , 蒋玉香 , 黄陈勇

分析化学 doi:10.11895/j.issn.0253-3820.160023

利用树枝状分子-金纳米粒子复合物修饰电极和金纳米粒子标记物构建电化学免疫传感器,用于污泥中大肠杆菌的检测。首先在玻碳电极表面电聚合对氨基苯甲酸,通过共价作用结合第Ⅳ代氨基末端的树枝状分子(G4-PAMAM),并在其内部载入金纳米粒子,制备修饰电极(GCE/p-ABA/PAMAM(AuNPs)),用于固定大肠杆菌。采用硫堇作为电活性物质包被金纳米粒子,用于标记二抗制备金纳米粒子标记物(Ab2-Au-Th)。通过抗原-抗体之间的特异性识别作用,将一抗、金纳米粒子标记物依次修饰在电极表面,用差分脉冲伏安法测定硫堇产生的电流信号,实现对大肠杆菌的检测。在优化的实验条件下,响应电流与大肠杆菌浓度的对数在1.0×102~1.0×106 cfu/mL范围内呈线性关系,检出限为70 cfu/mL(S/N=3)。利用本方法检测污水处理厂的不同污泥样品中的大肠杆菌,回收率为89.4%~105.8%。

关键词: 城市污泥 , 大肠杆菌 , 树枝状分子 , 功能化金纳米粒子 , 电化学免疫传感

Ce3+对大肠杆菌感受态建立和转化的影响

谢志雄 , 欧剑虹 , 赵儒铭 , 沈萍

稀土 doi:10.3969/j.issn.1004-0277.2003.04.015

利用Mg2+、Ce3+取代Ca2+诱导大肠杆菌感受态的建立,发现Mg2+、Ce3+不能独立诱导大肠杆菌建立感受态,只有在存在Ca2+的情况下才能诱导大肠杆菌建立感受态,Mg2+和Ce3+在低浓度时可以提高转化效率,但在高浓度时对转化有抑制作用,结果表明Ce3+与Ca2+一样,可能对大肠杆菌转化具有生理性调节作用.

关键词: Ce3+ , 大肠杆菌 , 感受态 , 转化

左氧氟沙星在针铁矿-溶液体系存在形态对大肠杆菌的毒性效应?

王阳 , 刘菲 , 秦晓鹏 , 李璐 , 李晋阳

环境化学 doi:10.7524/j.issn.0254-6108.2015.05.2014081206

通过批试验研究了针铁矿存在时,左氧氟沙星对大肠杆菌的毒性效应以及吸附态的左氧氟沙星对微生物生长的影响.结果表明,中性条件下存在培养基时,左氧氟沙星在针铁矿上4h可达到吸附平衡,吸附等温线符合Freundlich吸附方程,傅里叶变换红外光谱分析得出左氧氟沙星的羧酸基团和酮基基团与针铁矿表面发生络合作用;0.016 g针铁矿的存在一定程度上能够促进大肠杆菌的生长(约50%),随着针铁矿含量的变化(0—0.1 g),在扣除其生长促进的影响后左氧氟沙星对大肠杆菌的毒性作用仍显著减弱,由90%降低至60%.

关键词: 针铁矿 , 左氧氟沙星 , 大肠杆菌 , 吸附

负载型TiO2/玻璃弹簧的光催化杀菌作用

曾炽涛 , 陈爱平 , 陈爱华 , 刘伟 , 戴智铭

催化学报

研究了自主开发的负载型TiO2/玻璃弹簧光催化剂对大肠杆菌的光催化杀菌作用. 结果表明,光催化杀菌效果明显好于单独紫外光的杀菌效果. 光催化杀菌过程存在一个诱导期. 用扫描电镜和透射电镜观察经不同时间杀菌处理的菌液,结果显示光催化作用于细菌的细胞壁和细胞膜,使其破裂并导致细胞死亡. 探讨了光催化剂的制备条件(如浸涂浆料浓度、浸涂次数、热处理条件等)对光催化杀菌效率的影响.

关键词: 二氧化钛 , 玻璃弹簧 , 负载型催化剂 , 光催化 , 杀菌 , 大肠杆菌

Ag/Cu共渗不锈钢表面的微观结构及抗菌性能研究

倪红卫 , 詹玮婷 , 陈荣生

材料导报

以银铜合金为靶材,利用辉光等离子体在AISI304不锈钢表面同时渗入银和铜,制备性能优良的抗茵不锈钢.对渗层的形貌、化学组成、耐蚀性能和抗菌性能进行了研究,结果表明,所得渗层在不锈钢表面分布均匀,Ag/Cu元素质量比为4.9∶3;不锈钢表面渗层腐蚀电位由-0.103V提高到0.07V,自腐蚀电流密度从1.66×10-7A/cm2降至5.813×10-9A/cm2,耐腐蚀性能有所提高;渗层对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的杀菌率均达100%.

关键词: 辉光等离子体 , 抗菌不锈钢 , 极化曲线 , 大肠杆菌 , 金黄色葡萄球菌

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