唐秀芳
,
甄乾娜
,
樊子勉
,
冯成亚
,
丁敏
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2012.03026
建立了一种柱前衍生高效液相色谱-荧光检测法用于测定血浆中同型半胱氨酸(Hcy).使用三(2-羧乙基)膦盐酸盐(TCEP)为还原剂,N-(1-芘)马来酰亚胺(NPM)为衍生剂进行样品预处理,Agilent Hypersil C-18柱(250mm ×4.0 mm,5μm)进行分离,流动相为15 mmol/L醋酸钠-乙腈-混合酸(300 mL水中含1mL醋酸和1mL磷酸)混合溶液,采用梯度洗脱,荧光检测激发波长为330nm,发射波长为380 nm.Hcy的回收率为(102.08±4.94)％.线性范围为0.500～100μmol/L,检出限(以信噪比为3计)为0.016μmol/L.日内与日间相对标准偏差均小于5％.利用该方法对7例高血压患者和7例健康志愿者的血浆进行了测定,结果表明两组间的Hcy含量存在显著的差异(p＜0.05).本方法简单、快速、灵敏、特异,适用于血浆Hcy的临床定量测定.
关键词:
高效液相色谱
,
荧光检测
,
同型半胱氨酸
,
血浆
韩吉春
,
李广林
,
王小臣
,
骆亦奇
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2016.02006
建立了一种高通量液相色谱-串联质谱技术检测干血点（ DBS）中同型半胱氨酸（ homocycteine，Hcy）的方法。以 DBS为样本，homocystine-D8为同位素内标，二硫苏糖醇（ DTT ）为蛋白结合态 Hcy 的还原剂，使用含0.1％（ v／v）甲酸、0.05％（ v／v）三氟乙酸的乙腈溶液萃取。整个前处理过程使用自动移液平台及96孔板实现高通量自动化操作。处理后的样本经过 Phenomenex CN柱分离，使用多反应监测模式进行 LC-MS／MS 分析。结果表明：Hcy的检出限为0.12μmol／L（ S／N=3），定量限为0.46μmol／L（ S／N=10）。Hcy 在1.16~148.00μmol／L 范围内线性关系良好，R2=0.994。Hcy 的平均回收率为（103.0±4.97）％~（112.0±2.13）％，日内相对标准偏差（ RSD）为1.9％~4.6％，日间 RSD为1.5％~7.1％。DBS 样本在不同温度（-4、-20、22和37℃）下储存不同时间（0、1、2、3、4、5、6、14天）后的稳定性试验显示样本总体 RSD﹤15％，经前处理后的样本在48 h内的稳定性试验显示样本总体 RSD﹤5％。该方法与传统生化分析方法的相关性好（ R2=0.9818，n=47）。
关键词:
液相色谱-串联质谱
,
自动移液平台
,
同型半胱氨酸
,
干血点
