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邻苯二甲酸二丁酯免疫检测Ⅰ.人工抗原的制备及表征

张明翠 , 庄惠生 , 郎庆

应用化学 doi:10.3969/j.issn.1000-0518.2006.08.007

通过保留丁酯基结构和在芳环上引入氨基取代基合成了一种邻苯二甲酸二丁酯半抗原衍生物4-氨基邻苯二甲酸二丁酯,通过 1H NMR、IR和UV确证了结构,其中4-硝基邻苯二甲酸二丁酯的2个紫外吸收峰分别为:λ1=212 nm,λ2=258 nm;4-氨基邻苯二甲酸二丁酯的2个紫外吸收峰分别为:λ1=226 nm,λ2=288 nm.半抗原衍生物通过重氮化反应与BSA偶联,得到人工抗原,经荧光光谱(λex=307 nm,λem=468 nm)、体系颜色变化和免疫实验确证偶联成功,抗原结合比为13:1,为进一步的抗体制备和免疫分析提供可靠的免疫原.

关键词: 邻苯二甲酸二丁酯 , 人工抗原 , 半抗原 , 制备 , 表征

小分子抗原人工合成进展

王建华 , 张冲

应用化学 doi:10.3724/SP.J.1095.2011.00364

小分子免疫分析技术的应用日渐广泛,合成稳定的、具有良好免疫原性的人工抗原是制备单克隆抗体和建立免疫分析方法的前提和关键.本文对国内外半抗原的设计与合成方法、载体的选择、半抗原与载体的耦联方法等进行了综述,并对小分子抗原人工合成中相关的问题进行了讨论.

关键词: 人工抗原 , 半抗原 , 合成 , 免疫分析

新型游离三碘甲腺原氨酸人工抗原的合成与表征

印晓梅 , 于海涛 , 王小龙

应用化学 doi:10.3724/SP.J.1095.2013.20570

利用快速、温和的“Click Chemistry(点击化学)”反应,在游离三碘甲腺原氨酸(FT3)的羧基上引入一个带有三唑环的羧基“间接臂”,生成半抗原(FT3C).再用N-羟基琥珀酰亚胺活性酯法,将半抗原(FT3C)分别与牛血清白蛋白(BSA)和钥孔戚血蓝素(KLH)偶联,合成了免疫抗原(FT3C-BSA)和包被抗原(FTCKLH).免疫抗原(FT3C-BSA)的紫外吸收光谱相对于FT3C和BSA有明显差异,表明成功实现了偶联,经计算得到偶联比为7∶1;用FT3 C-BSA免疫Balb/c小鼠,获得高效价的抗FT3血清.采用间接ELISA法检测抗体的IC50值为0.37 mg/L,抗血清效价可达6.24×104,是制备FT3人工抗原的一种新方法.

关键词: 游离三碘甲腺原氨酸 , 点击化学 , 半抗原 , 人工抗原

以烟草花叶病毒为半抗原载体的活体免疫反应

赵霞 , 陈利民 , 胡君 , 张晓磊 , Jittima Amie Luckanagul , 林园 , 王倩

应用化学 doi:10.11944/j.issn.1000-0518.2015.10.150116

以烟草花叶病毒的赖氨酸突变体(TMV-EPMK)为半抗原载体,利用"点击化学"反应,将半抗原小分子雌三醇(E3)经由两个不同亲/疏水性的连接臂修饰在TMV-EPMK上,成功制备了TMV-EPMK/E3完全抗原.通过免疫实验发现,以亲水性连接臂制备的TMV-EPMK/E3偶联体可在小鼠体内诱导更高水平的E3特异性免疫反应,所产生的IgG抗体的滴度达21800.该结果表明,以烟草花叶病毒为载体制备的完全抗原,其免疫原性受连接臂性质的影响,亲水性的连接臂更有利于抗体反应的发生.

关键词: TMV-EPMK , 点击化学 , 半抗原 , 人工抗原 , 免疫反应

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