吴漪
,
张晓晖
,
魏娟
,
薛云云
,
玛尔江·巴哈提别克
,
王彦
,
阎超
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2009.05.012
毛细管电色谱(CEC)以内含色谱固定相的毛细管为分离柱,以电渗流为驱动力,既可以分离带电物质也可以分离中性物质.它结合了毛细管电泳和高效液相色谱两者的优点,兼具高柱效、高分辨率、高选择性和高峰容量的特点,同时具有色谱和电泳的双重分离机理.然而,"纯粹"的电色谱在实际应用中有着天然的弱点,即:在电流通过毛细管柱中的流动相时容易产生气泡(焦耳热作用),从而使电流中断和电渗流停止,毛细管柱必须被重新用流动相润湿后方能再次使用.加压毛细管电色谱(pCEC)将液相色谱中的压力流引入CEC系统中,不仅解决了气泡、干柱等问题,而且实现了定量阀进样和二元梯度洗脱.CEC和pCEC作为微分离领域的两种前沿技术,满足了当前复杂样品分析和分析仪器微型化的需求,近年来获得了广泛的关注.本文综述了这两种技术近来的发展,包括仪器、色谱固定相的发展,总结了其在生命科学、药物分析、食品安全以及环保样品分析等方面的应用进展,评述了各方法的特点,并展望了CEC和pCEC今后的发展和应用前景.
关键词:
毛细管电色谱
,
加压毛细管电色谱
,
固定相
,
生物分析
,
药物分析
,
食品分析
,
环境分析
高也
,
王彦
,
王超然
,
谷雪
,
阎超
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2011.12038
以N,N-二甲基-N-甲基丙烯酰胺基丙基-N,N-乙甲基-N-丙烷磺酸内盐(SPP)为单体,季戊四醇三丙烯酸酯(PETA)为交联剂,偶氮二异丁腈(AIBN)为引发剂及两类不同的致孔剂(乙醇/乙二醇和甲醇/1,4-丁二醇)制备了两种新型亲水性整体柱.为了获得理想的柱效、电渗流速度和渗透性,对制备整体柱的各反应物配比进行了研究和优化.比较了两种整体柱在渗透性和分离样品方面的性能,结果表明,以乙醇/乙二醇为致孔剂制备的整体柱在柱效、分离度方面优于以甲醇/1,4.丁二醇为致孔剂制备的整体柱,但在渗透性方面不及后者.探讨了流动相中盐浓度对核苷类样品保留的影响,发现当甲酸铵浓度从10 mmol/L增加到70 mmol/L时,核苷样品的保留因子呈现先增加后减小的状态.将制备的整体柱用于毛细管液相色谱和加压电色谱分别分离胺类、酚类和核苷类样品,获得了理想的分离效果.在分离酚类和核苷类混合样品时,发现加压毛细管电色谱在分离度和分离速度上均优于毛细管液相色谱.
关键词:
亲水整体柱
,
制备
,
毛细管液相色谱
,
加压毛细管电色谱
,
胺类化合物
,
酚类化合物
,
核苷类化合物
赵良娟
,
邹娟娟
,
王秀丽
,
阎超
,
高如瑜
,
刘明羽
,
吕宪禹
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2005.06.022
以1.5 μm无孔硅胶颗粒(non-porous silica,NPS)为固定相,采用电压和压力联合驱动流动相,用反相梯度加压毛细管电色谱(p-CEC)在7.5 min内实现了核糖核酸酶A、细胞色素C、溶菌酶和肌红蛋白等4种蛋白质的快速、高效的分离.比较了梯度加压毛细管电色谱和微柱液相色谱(μ-HPLC)分离蛋白质的结果,同时考察了固定相、离子对试剂三氟醋酸(TFA)浓度和电压等条件对梯度加压毛细管电色谱分离蛋白质的影响.结果表明,梯度p-CEC可以通过调节电压精细调节带电溶质的保留,提高分离选择性,缩短分离时间,得到较高的柱效.该方法在蛋白质分离分析及蛋白质组学的研究中具有很大的应用潜力,为高效快速地分离蛋白质开辟了新的途径.
关键词:
梯度洗脱
,
加压毛细管电色谱
,
反相色谱
,
蛋白质
赵震震
,
瞿其曙
,
张欣欣
,
谷雪
,
王彦
,
阎超
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2009.04.010
制备了用于色谱的微米纯金颗粒并键合上十八烷基(C18)官能团;对其进行了扫描电镜、红外光谱、元素分析、氮气吸附分析等表征.测得衍生的金颗粒的粒径、孔径以及比表面积分别为3.5 μm、5.0 nm、49.0 m2/g;红外光谱表明C18官能团已键合在金颗粒表面上;衍生后的金颗粒的含碳量为0.56% .通过电填充法得到长度为36 cm(固定相填充长度为19 cm)、内径为100 μm的毛细管色谱柱.利用极端pH的流动相(80%甲醇,pH 1.0以及pH 12.0)冲洗该色谱柱140 h,比较冲洗前后分析物的保留因子,以考察色谱柱的耐酸耐碱性能.结果表明,冲洗前后分析物的保留因子没有明显的变化,说明该色谱柱有良好的耐酸耐碱性.在毛细管液相色谱模式下,用该柱分离尿嘧啶、苯、萘、2-甲基萘、苊以评价色谱柱的一般性能;在碱性条件下分离咖啡因、茶碱、洛贝林以测定色谱柱分离碱性物质的能力.其分离结果表明,该色谱柱的柱效超过了 50 000 理论塔板/m,且色谱峰形较好.在毛细管加压电色谱模式下,施加+5 kV和-5 kV的电压均可以使苯甲酸和苯胺分离,但电场方向不同时,二者的出峰顺序不同.
关键词:
C18衍生微米金颗粒
,
色谱固定相
,
毛细管液相色谱
,
加压毛细管电色谱
吴翊民
,
吴庆政
,
王晓春
,
谢增鸿
,
吴晓苹
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2010.00247
一种新型的亲水作用毛细管电色谱(HI-CEC)整体柱被应用于加压毛细管电色谱-激光诱导荧光检测(pCEC-LIF)联用法对核黄素类物质的分离分析.采用自组装的pCEC-LIF系统,实现了对痕量核黄素(RF)、黄素单核苷酸(FMN)和黄素腺嘌呤二核苷酸(FAD)的快速分析.在最优的分离检测条件下,3种化合物在8.0 min内完全分离,RF、FMN和FAD的检出限(LOD,S/N=3)分别为5.0×10~(-11) mol/L、8.0×10~(-10) mol/L 和2.5×10~(-9) mol/L,测定线性范围可达3个数量级,精密度良好.方法简便、全分析时间短、灵敏度和选择性高,血清样品分析实验结果良好,可望进一步应用于体液及细胞中核黄素类物质的痕量检测.
关键词:
加压毛细管电色谱
,
亲水作用
,
整体柱
,
激光诱导荧光检测
,
核黄素类物质
,
血清
李新燕
,
王彦
,
谷雪
,
陈妍
,
阎超
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2010.00231
以甲基丙烯酸丁酯(BMA)和3-[N,N-二甲基-[2-(2-甲基丙-2-烯酰氧基)乙基]铵]丙烷-1-磺酸内盐(SPE)为单体,制备了新型的亲水作用毛细管整体柱,并通过三聚氰胺在此柱上的保留行为证明其具有亲水性.以加压毛细管电色谱(pCEC)技术为平台,优化了整体柱基于亲水作用分离分析奶制品中三聚氰胺的色谱条件.当流动相中乙腈与10 mmol/L 磷酸盐缓冲液的体积比为80:20,pH为3.0,电压为 3 kV,检测波长为215 nm时,三聚氰胺能获得很好的分离.方法学考察结果表明,合成的亲水整体柱具有良好的重现性和渗透性,建立的pCEC分析方法的检出限为0.05 mg/L.该方法简单方便,回收率较高,而且流动相中无需添加离子对试剂,适合于奶制品中三聚氰胺的定量测定.
关键词:
亲水作用毛细管整体柱
,
制备
,
加压毛细管电色谱
,
三聚氰胺
,
奶制品
李博祥
,
郑敏敏
,
卢兰香
,
吴晓苹
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2011.00798
采用反相加压毛细管电色谱与紫外检测联用技术,建立了一种高效、简便的糖皮质激素分析方法,适用于头发中糖皮质激素的检测.使用C18反相色谱柱,流动相为pH 8.0,1.5 mmol/L的Tris-乙腈(65:35,v/v),检测波长为245 nm、分离电压为-10 kV、反压为10.5 MPa、泵流速为0.05 mL/min,进行等度洗脱,倍他米松、地塞米松、泼尼松、泼尼松龙、醋酸泼尼松龙、醋酸氢化可的松、醋酸可的松、皮质脂酮等8种激素在20 min内实现快速分离.各组分的质量浓度线性范围达到3个数量级,检出限(S/N=3)在μg/g水平,迁移时间和峰面积的相对标准偏差(RSD)分别小于4.8％和7.4％.将所建立方法应用于头发样品分析,检测前采用蛋白酶水解提取和净化处理样品,不同浓度糖皮质激素的回收率为71％ ～85％.该研究为糖皮质激素药物暴露监测以及压力检测提供了新手段,有望用于滥用药物的控制和临床诊断.
关键词:
加压毛细管电色谱
,
紫外检测
,
糖皮质激素
,
头发
况媛媛
,
王彦
,
谷雪
,
李静
,
阎超
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2013.11003
使用新型二元致孔剂聚乙二醇（PEG）/甲醇，以 N，N-二甲基-N-甲基丙烯酰胺基丙基-N，N-二甲基-N-丙烷磺酸内盐（SPP）为单体，季戊四醇三丙烯酸酯（PETA）为交联剂，偶氮二异丁腈（AIBN）为引发剂，通过原位聚合法制备磺酸甜菜碱型两性离子亲水毛细管整体柱。对各反应物的配比进行了优化。结果表明，当单体与致孔剂的质量比为1：2.5，并且致孔剂中 PEG 与甲醇的质量比为1：2，单体内部 SPP 与 PETA 的质量比为1：1，AIBN 为总质量的0.1％时为最优配比；PEG /甲醇二元致孔剂的加入实现了对整体柱内部孔径大小的调节，得到了结构更为均一，渗透性、机械稳定性良好的毛细管整体柱，并且理论塔板数与传统制备方法相比有显著提高，在毛细管液相色谱模式下最高可达2．4×105塔板/ m。将制备的整体柱应用于毛细管液相色谱和加压毛细管电色谱分离酚类、核苷类等极性小分子混合物，得到了很好的分离效果。
关键词:
二元致孔剂
,
磺酸甜菜碱
,
两性离子亲水整体柱
,
毛细管液相色谱
,
加压毛细管电色谱
汪慧
,
薛芸
,
鲁阳芳
,
谷雪
,
王彦
,
阎超
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2014.12002
利用醛基和氨基之间的席夫碱反应在SiO2微球表面引入聚合物分子聚乙烯亚胺（ polyethyleneimine，PEI），以提高微球表面的氨基含量；然后利用自组装-化学镀法制备了 SiO2@ Au 核壳填料，并对制备过程中反应溶液的pH值和甲醛用量进行了优化。场发射扫描电子显微镜表征结果显示，经过条件优化后制备的 SiO2@Au 核壳颗粒的表面 Au包覆量较高，且包覆均匀、分散性较好。最后将谷胱甘肽（ glutathione，GSH）分子修饰在 SiO2@ Au 表面，条件优化后成功地制备了一种新型的两性离子型亲水色谱材料 SiO2@ Au-GSH，并将该填料填入毛细管中，制备了 SiO2@Au-GSH两性离子型毛细管亲水色谱柱，并在毛细管液相色谱和加压毛细管电色谱系统中考察了色谱柱的亲水性能，研究证明 SiO2@Au-GSH毛细管柱具有较好的分离能力和亲水性质。
关键词:
聚乙烯亚胺
,
SiO2Au核壳填料
,
谷胱甘肽
,
毛细管亲水色谱柱
,
毛细管液相色谱
,
加压毛细管电色谱
翁中亚
,
薛芸
,
施文君
,
王彦
,
阎超
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2015.12040
以丙烯酰胺（ AM）为单体，八乙烯基倍半硅氧烷（ POSS）为交联剂，偶氮二异丁腈（ AIBN）为引发剂，四氢呋喃（ THF）为致孔剂，通过原位聚合法制备了 poly（ POSS-co-AM）有机-无机杂化整体柱，并对各反应物的配比进行了优化。结果表明，当功能单体与致孔剂、POSS 与 AM 的质量比均为1．0：5．0，AIBN 的质量分数为0.1％时，杂化整体柱的柱效最高。无机材料的引入使整体柱结构均匀并具有良好的渗透性，该整体柱既能用于亲水色谱模式，也能用于反相色谱模式。将制备的整体柱用于毛细管液相色谱和加压毛细管电色谱分离核苷类、胺类、硝基苯胺类等化合物，获得了良好的效果。
关键词:
丙烯酰胺
,
八乙烯基倍半硅氧烷
,
杂化整体柱
,
毛细管液相色谱
,
加压毛细管电色谱
