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汽巴蓝功能微球对人血清白蛋白的吸附性能研究

沈红燕 , 熊万斌 , 杨吉 , 龚雁 , 刘晓亚 , 陈明清

功能材料

通过分散共聚制得了聚苯乙烯接枝聚醋酸乙烯酯(PSt-g-PVAc)微球,粒径控制在500~700nm之间.在碱性条件下将PSt-g-PVAc微球表面的PVAc链醇解为聚乙烯醇(PVA),得到了PSt-g-PVA微球,提高了其在水中的分散稳定性.使汽巴蓝(CB)与PSt-g-PVA表面的羟基进行亲核反应,制得了CB作为配体的新型吸附剂汽巴蓝功能微球(CB微球),元素分析测得CB微球表面的CB最大含量为139.22μmol/g,探讨了其在不同人血清白蛋白(HSA)浓度、pH值和吸附时间下对HSA的吸附性能.当HSA浓度为1.0mg/mL、pH为5.14时,CB微球对HSA的最大吸附量为40.9mg/g,并分析了CB微球与HSA的相互作用机理.由NaSCN进行解吸试验,发现可将吸附在CB微球上的HSA解吸92.11%以上,且CB微球的重复使用性能良好.

关键词: 人血清白蛋白 , 分散共聚 , CB微球 , 吸附

竹红菌素金属配合物与人血清白蛋白相互作用的光谱研究

金咪咪 , 欧植泽 , 高云燕 , 郝萍 , 殷卫峰 , 刘丽华

影像科学与光化学

利用多种光谱方法研究了Mg~(2+)-HA, Y~(3+)-HA, La~(3+)-HA等竹红菌甲素金属离子配合物(M-HA)与人血清白蛋白(HSA)之间的相互作用. 结果表明在pH 7.4和5.0条件下M-HA能够与HSA形成1:1的复合物, 其结合常数均大于2×10~4 L/mol. 电子自旋共振和荧光猝灭实验表明HSA和M-HA在激发态条件下具有光诱导电子转移作用.

关键词: 竹红菌素 , 人血清白蛋白 , 静电相互作用 , 光诱导电子转移 , 荧光猝灭

硅掺杂羟基磷灰石生物活性微粉对人血清白蛋白的吸附特性

肖凤娟 , 张颖 , 王少辉 , 高峻峰

复合材料学报

对含硅羟基磷灰石(Si-HA)与人血清白蛋白(HSA)的吸附特性及动力学特征进行了研究,计算了表观活化能,用等温吸附曲线进行拟合.结果表明,该吸附属于Langmuir型.Si-HA和HA吸附HSA的表观活化能分别为21.28和35.57 kJ·mol-1,20℃下吸附反应的速率常数分别为1.48和1.34 min-1,饱和吸附量分别为25.34和21.34 mg·g-1,Si-HA具有比纯HA更好的吸附优势.通过XRD、FTIR及荧光光谱分析,探讨了HSA在Si-HA和HA表面的吸附作用机制,表明Si-HA与蛋白表面吸附反应是以化学吸附为主、包含物理吸附的混合吸附过程.从分子结构的角度揭示了Si-HA和HA吸附蛋白质性能的差异,为进一步探讨Si-HA和HA生物相容性提供了新途径.

关键词: 硅掺杂 , 羟基磷灰石 , 生物活性 , 人血清白蛋白 , 吸附 , 动力学

高效迎头分析法测定药物-人血清白蛋白混合液中游离药物浓度

乔明曦 , 郭兴杰 , 李发美

色谱 doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2001.04.011

用高效迎头分析法(HPFA)测定了药物-人血清白蛋白(HSA)混合液中游离药物的浓度。样品溶液不经任何处理直接进样到装有内表面反相固定相的色谱柱中,用67 mmol/L磷酸盐缓冲液(pH 7.4,I=0.17 mol/L)作流动相。当进样体积足够大时,游离药物以平顶峰的形式被洗脱出来,平顶峰区域洗脱液中的药物浓度等于样品溶液中游离药物的浓度。收集平顶峰区域的洗脱液,然后将一定体积的洗脱液注入到反相色谱柱中,测定游离药物的浓度。用该法测定酮基布洛芬-HSA和头孢哌酮-HSA两种混合液中游离药物的浓度,并与超滤法进行了比较;考察了进样体积和流速对平顶峰形成的影响。结果表明,获得平顶峰所需的最小进样体积随药物不同而不同;流速对平顶峰的形成没有影响。高效迎头分析法与超滤法测得的游离药物浓度相同,并且具有相似的精密度。

关键词: 高效迎头分析法 , 超滤法 , 游离药物浓度 , 头孢哌酮 , 酮基布洛芬 , 人血清白蛋白

亲和膜用于去除医药及人血清白蛋白溶液中的内毒素

魏桂林 , 刘学良 , 李京华 , 刘莺 , 商振华

色谱 doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2002.02.003

以纤维素膜为基质材料,制备了3种用于去除内毒素的亲和膜,分别为壳聚糖亲和膜(KFCC517),疏水阳离子亲和膜(KFCG316)和金属螯合物亲和膜(KFCG402).研究了亲和膜对内毒素的吸附容量及在内毒素去除方面的应用,结果表明这3种亲和膜都可以用于多种溶液中内毒素的去除.考察了离子强度、pH值以及流速对去除效果的影响,并分析了原因.KFCC517,KFCG316,KFCG402都可用于人血清白蛋白溶液中内毒素的去除,KFCC517还可用于医药制剂如氢化可的松、葛根素、盐酸丁卡因和右旋糖苷40葡萄糖注射液中内毒素的去除,在所选择的条件下,内毒素的去除效率高于80%,有用物质的回收率为95%以上.

关键词: 内毒素 , 去除 , 亲和膜 , 人血清白蛋白 , 医药

盐酸丙咪嗪-人血清白蛋白结合作用的毛细管区带电泳测定法

周大炜 , 李发美

色谱 doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2003.02.011

采用毛细管区带电泳(CZE)技术,研究了抗抑郁三环类碱性药物盐酸丙咪嗪与人血清白蛋白(HSA)的结合作用.通过经典方法(超滤法)对该方法进行了方法学确证.该法适宜于水溶性良好的碱性药物(迁移时间足够短,且与蛋白质形成的复合物较稳定)-蛋白系统中分子间相互作用的定量考察.应用SAS 统计软件中非线性回归分析平台自编程序,求得了丙咪嗪与HSA的结合常数和结合位点数:K=0.18 L/μmol;n=2.2. 实验证明:该法可靠、简单、高效、低耗.

关键词: 毛细管区带电泳 , 人血清白蛋白 , 丙咪嗪 , 结合参数

微透析探针的制备及其在Ni(Ⅱ)与人血清白蛋白的相互作用研究中的应用

郭明 , 孔亮 , 厉欣 , 邹汉法

色谱 doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2003.02.012

介绍了一种自制微透析探针的制备方法,考察了灌流液流速、温度以及探针膜面积等因素对金属离子Ni(Ⅱ) 回收率的影响.实验结果表明:自制微透析探针透析金属离子的各种指标都与商品的微透析探针性能相当,可以替代商品化微透析探针研究金属离子与蛋白质的相互作用.利用微透析与高效液相色谱联用技术研究了Ni(Ⅱ)与人血清白蛋白(HSA)的相互作用.用自制的微透析探针测定Ni(Ⅱ)与HSA之间的第一结合位点数和结合常数分别为1.16和8.6×105 L/mol,采用商品的微透析探针测定的结果分别为1.23和7.5×105 L/mol.

关键词: 微透析探针 , 制备 , 高效液相色谱 , 人血清白蛋白 , 镍离子

酮洛芬与蛋白结合作用的高效液相色谱-迎头分析法研究及其与高效毛细管电泳-迎头分析法的比较

周大炜 , 李发美

色谱 doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2004.06.007

采用高效液相色谱-迎头分析法(HPLC-FA),以67 mmol/L (pH 7.4, I=0.17 mol/L) 的等渗磷酸盐缓冲液为流动相,Pinkerton GFF Ⅱ-S5-80内表面反相柱(150 mm×4.6 mm i.d., 5 μm)为固定相,254 nm下检测,研究了酮洛芬与人血清白蛋白(HSA)的结合作用,通过非线性回归参数估算求得酮洛芬与HSA的结合参数.与高效毛细管电泳-迎头分析法(HPCE-FA)相比,HPLC-FA法具有高灵敏度的优势,但进样量较大,分析时间较长.HPLC-FA法的测定结果表明,HSA分子上酮洛芬的两类结合位点(第一类和第二类)共存.当酮洛芬与HSA的量比较低时,酮洛芬主要结合在第一类位点;当它们的量比较高时,结合才发生在第二类结合位点.

关键词: 高效毛细管电泳-迎头分析 , 高效液相色谱-迎头分析 , 人血清白蛋白 , 蛋白结合作用 , 酮洛芬

高效亲和色谱法测定丹皮酚与固定化人血清白蛋白结合域

于雪 , 张君才 , 卫引茂

色谱 doi:10.3724/SP.J.1123.2010.00688

利用亲和色谱,在模拟人体生理环境下(37 ℃、pH 7.4),采用竞争置换法研究了丹皮酚(PAE)与固定化人血清白蛋白(HSA)的相互作用.通过对PAE的自我竞争分析及PAE与HSA上结合位点的标记物间的竞争置换分析,得到了PAE和HSA间的结合常数、结合位点数和结合域.结果表明:PAE在HSA分子中仅存在一类结合位点,结合常数为4.84×103 L/mol,该结合位点为HSA上的Sudlow siteⅡ;通过对PAE与HSA相互作用的热力学研究,推断出二者间的作用力类型为氢键或范德华力.

关键词: 高效亲和色谱 , 竞争置换分析 , 丹皮酚 , 人血清白蛋白

高效亲和色谱法测定2种中药成分与人血清白蛋白的结合率

蔡晓明 , 张岩 , 于龙 , 郭志谋 , 张秀莉 , 梁鑫淼

色谱 doi:10.3724/SP.J.1123.2011.00358

采用高效亲和色谱技术(HPAC)对中药成分与人血清白蛋白(HSA)的相互作用进行了研究.首先采用点击化学的方法制备了表面键合有HSA蛋白的硅胶固定相并装填成亲和色谱柱,根据药物在该色谱柱上与空白硅胶柱上的保留时间差计算得到药物与蛋白的结合率.利用该方法测得模型化合物华法令与HSA的结合率与文献中采用超滤法测得的结果基本一致,表明该方法可用于测定药物与HSA的结合率.在此基础上用该方法测定了葛根素和告依春两种中药成分与HSA的相对结合率分别为10.26%和10.20%.同时用超滤的方法测定了葛根素与HSA的结合率为14.25%.结果表明,HPAC可以作为研究药物与蛋白相互作用的一种简便可行的方法,其测定结果与超滤方法一致.

关键词: 高效亲和色谱法 , 人血清白蛋白 , 葛根素 , 告依春 , 结合率 , 超滤

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