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用新型尼龙亲和膜纯化人血浆蛋白

甘宏宇 , 商振华 , 秦国平 , 刘学良 , 王俊德

色谱 doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2001.03.004

以微孔尼龙膜为基质,分别采用三氯三嗪和1,4-丁二醇二甘油醚活化法制备了一系列亲和膜.首次使用平板亲和膜方法经一步操作即从人血浆中纯化得到高纯度的γ-球蛋白、纤溶酶原.电泳分析显示,纯化得到的人血浆γ-球蛋白,纯度在83%以上;纯化得到的γ-球蛋白和纤溶酶原的纯度均高于市售同类产品;另外,初步探索了人血浆凝血酶的一步纯化法.该法纯化得到的凝血酶比活为42.0 NIH单位/mg~42.5 NIH单位/mg.

关键词: 亲和膜色谱 , 尼龙膜 , 人血浆 , 纯化 , γ-球蛋白 , 纤溶酶原 , 凝血酶

尼龙亲和膜的制备条件优化及其表征

聂华丽 , 陈天翔 , 朱利民

膜科学与技术 doi:10.3969/j.issn.1007-8924.2011.02.014

尼龙膜经稀盐酸水解、壳聚糖改性后,以木瓜蛋白酶为亲和膜的配基,通过戊二醛的活化处理后采用共价结合的方法将配基键合在尼龙膜上,从而得到有特异吸附性能的尼龙亲和膜.本实验考察了制备尼龙亲和膜的交联剂戊二醛的质量分数、pH值、温度、反应时间和酶用量对亲和膜上木瓜蛋白酶活力的影响,确定了最适合的制备条件:pH=9.0,质量分数为0.5%的戊二醛,反应温度为45℃,反应时间为6 h,酶用量为10 mg/mL.该优化条件下制备的尼龙亲和膜具备优良的色谱性能,可用于分离纯化半胱氨酸蛋白酶抑制剂.

关键词: 亲和膜色谱 , 壳聚糖 , 木瓜蛋白酶 , 半胱氨酸蛋白酶抑制剂

尼龙亲和膜的制备及其对木瓜蛋白酶的分离纯化研究

聂华丽 , 陈天翔 , 朱利民

膜科学与技术 doi:10.3969/j.issn.1007-8924.2008.01.004

以尼龙膜为基质,键合壳聚糖的方法对尼龙膜进行改性,使膜的非特异性吸附大大降低,并偶联活性染料亲和基 Cibacron Blue F3GA,得到一种新的染料亲和膜.该亲和膜具有良好的色谱性能,对木瓜蛋白酶有较高的吸附量(235.3mg/g),吸附行为满足 Freundlich 吸附模型,pH值和离子强度对吸附量有明显影响.使用该亲和膜对木瓜粉中的木瓜蛋白酶进行分离纯化,纯化倍数可达46.5倍.

关键词: 活性蓝cibacron blue 3GA , 木瓜蛋白酶 , 亲和膜色谱 , 壳聚糖

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