夏之宁
,
刘勇
,
张小川
,
屈鹏程
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2001.03.008
采用亲和毛细管电泳间接紫外检测方法,根据"峰漂移”模型,通过迁移时间的测定,可以获得在水体系中有极低亲和常数的金属络合物的亲和常数.将该方法分别应用于镁离子-柠檬酸体系和锰离子-酒石酸体系,在pH为5.01,运行电压为20kV,缓冲溶液组成为咪唑和醋酸的条件下,测定了缓冲溶液中加入不同浓度配体后金属离子迁移时间的变化,经过数据处理后得出它们的亲和常数对数值分别是3.27和2.28与文献值较为一致.该方法适用于结合比为1:1的金属络合物的亲和常数的测定.
关键词:
亲和毛细管电泳
,
间接紫外检测
,
亲和常数
,
镁离子
,
锰离子
,
柠檬酸
,
酒石酸
姚之
,
张浩波
,
武艺
,
郭怀忠
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2007.06.029
利用亲和毛细管电泳法对牛血清白蛋白(BSA)与加替沙星(GT)间的结合反应及其相互作用做了初步探索,并应用淌度比(M)作为指标测定了两者的结合常数.以20 mmol/L pH 7.4的磷酸盐缓冲液作为运行缓冲液,分别以GT和BSA作为添加剂,另一组分为进样样品,内标为二甲基甲酰胺,于214 nm波长下检测.两种测定条件下得到的结合常数分别为4.4×104 L/mol和4.2×104 L/mol,与传统的荧光淬灭法测得的结果基本一致.该方法具有简单、高效的优点.
关键词:
亲和毛细管电泳
,
牛血清白蛋白
,
加替沙星
,
结合常数
张月侠
,
宋茂勇
,
李涛
,
赛道建
,
汪海林
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2009.03.016
以一种高亲和力适配体作为亲和荧光探针,以自建的毛细管电泳-激光诱导荧光(CE-LIF)检测装置为基础,建立了一种高灵敏、快速测定人凝血酶的方法.荧光标记的凝血酶适配体特异性地与凝血酶结合并形成稳定的凝血酶-适配体复合物,采用CE-LIF对复合物进行分离检测,从而测定凝血酶浓度.探讨了盐离子种类及浓度对适配体与凝血酶结合的影响,并在选定的电泳条件下对凝血酶检测的线性范围、检出限和重现性进行了测定.结果表明,盐离子存在的条件下适配体与凝血酶的亲和力降低,不利于两者的结合;人血清溶液中,凝血酶浓度在0.25～10 nmol/L 范围内与复合物峰面积具有良好的线性相关性(r2=0.991),检出限(S/N=3)为55.6 pmol/L;精密度和回收率测定结果均能满足分析的要求.
关键词:
亲和毛细管电泳
,
激光诱导荧光检测
,
凝血酶
,
适配体
,
血清
王晓倩
,
高铁
,
洪专
,
屈锋
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2015.03026
基于亲和毛细管电泳，定性比较了血浆、肠道及细胞线粒体中所选的9种重要功能蛋白质与神经毒性生物毒素———软骨藻酸（ domoic acid，DA）的相互作用。以 DA淌度比变化量ΔM 与蛋白质浓度 L 作图，根据斜率值大小可比较 DA与蛋白质作用的相对强弱。结果如下：可与 DA相互作用的有6种蛋白质，作用强弱为：人凝血酶＞细胞色素 C≈胰蛋白酶≈免疫球蛋白 E（ Ig E）≈核糖核酸酶 A＞λ核酸外切酶；而铁蛋白、转铁蛋白、凝集素与 DA未表现出相互作用和亲和力。实验表明，亲和毛细管电泳具有高效、快速、所需样品量低的优点，可用于DA作用靶蛋白的筛选，为 DA的毒性机制研究和毒性防护提供基础信息。
关键词:
亲和毛细管电泳
,
软骨藻酸
,
蛋白质
,
相互作用
