张爱静
,
孟范平
高分子材料科学与工程
以壳聚糖微球(CS-MS)为载体,戊二醛(GA)为交联剂,制备固定化乙酰胆碱酯酶(AChE).通过测定各种条件对酶活回收率影响,确定适宜的固定条件为:将1 g CS-MS用5 mL体积分数0.5%的GA活化0.25 h,然后加到含0.75 UAChE、pH 7.0～7.5的PBS中振荡反应24 h.所得到的酶活回收率可达81.94%,优于同类研究水平.红外光谱分析证实,AChE通过共价键和氢键结合到载体上.扫描电镜观察表明,经活化后CS-MS呈蜂窝状且表面平整光滑,利于酶的固定.因此,CS-MS是一种很有潜力的固定AChE栽体.
关键词:
壳聚糖微球
,
乙酰胆碱酯酶
,
固定化
,
酶活回收率
张耀东
,
杨伯伦
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2006.01.010
提出了一种从基因工程毕赤酵母(Pichia pastoris)培养液中分离纯化重组巴西日圆线虫(Nippostrongylus brasiliensis)乙酰胆碱酯酶(NbAChE)的方法.采用Q-Sepharose Fast Flow强阴离子交换色谱柱对重组NbAChE进行了分离纯化.十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳分析表明,纯化物的活性峰为单一蛋白质带,其相对分子质量约为66000.该方法的活性回收率为52.6%,纯化因子为3.87;纯化后AChE的比活为2 837 U/mg.结果表明,该法是一种理想的分离纯化重组NbAChE的方法.
关键词:
阴离子交换色谱
,
乙酰胆碱酯酶
,
毕赤酵母
,
培养液
,
分离
,
纯化
张梅
,
汪莉
,
袁慧珍
,
刘丽
,
宋永海
,
叶树虹
,
肖贤平
,
王菁苒
,
刘慧萍
应用化学
doi:10.3724/SP.J.1095.2011.00766
制备了乙酰胆碱酯酶/Nafion/普鲁士蓝修饰的玻碳电极,测试了该修饰电极检测有机农药西维因(carbaryl)和敌百虫(trichlorfon)的性能指标.利用原子力显微镜和电化学技术研究了电极的构造及其对于有机农药检测性能指标的影响.结果表明,乙酰胆碱酯酶均匀地分散到Nafion/普鲁士蓝修饰的玻碳电极上.在最优的实验条件下,构筑的修饰电极检测西维因和敌百虫的线性范围分别为0.01 ～0.5 μmol/L及2.0～10.0 μmoL/L和0.02～ 1.0 μmol/L及2.0～8.0 μmol/L,检出限分别为5.0和10.0 nmol/L.并对模拟的实际样品进行了检测,发现该方法有较高的检测灵敏度、较好的重复性和抗干扰性.
关键词:
西维因
,
敌百虫
,
普鲁士蓝
,
Nafion
,
乙酰胆碱酯酶
,
电化学
康天放
,
刘润
,
鲁理平
,
程水源
应用化学
doi:10.3969/j.issn.1000-0518.2006.10.007
报道了一种用于测定有机磷和氨基甲酸酯类农药的安培型生物传感器. 将乙酰胆碱酯酶(AChE)固定在再生丝素粉末上,再将其与石墨粉、非导电的环氧树脂和电催化剂7,7,8,8-四氰基醌二甲烷(TCNQ)充分混合在一起,制备成生物传感器. 对生物传感器的制备条件进行了优化,具有良好的重现性和回收率,当氧化乐果及克百威的质量浓度分别在5.0×10-5～5.0×10-3 mg/L和5.0×10-5～1.0 mg/L范围内时,抑制率与其浓度的对数呈线性关系,检测限可分别达1.9×10-5和4.7×10-5 mg/L.
关键词:
生物传感器
,
乙酰胆碱酯酶
,
再生丝素
