费晓庆
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吴斌
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沈崇钰
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张睿
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丁涛
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李丽花
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2012.04015
采用液相色谱-同位素质谱联用法(LC-IRMS)建立了测定蜂蜜中外源性γ-淀粉酶残留量的方法.先采用凝胶色谱柱对蜂蜜样品进行预分离,将样品中所含的酶与糖分离开.根据γ-淀粉酶可将底物麦芽糖酶解为葡萄糖的原理,在55℃、pH4.5的0.03 mol/L磷酸盐缓冲液中将γ-淀粉酶与麦芽糖反应48 h后,采用LC分离麦芽糖和葡萄糖,以IRMS测定酶解产物葡萄糖的含量来确定γ-淀粉酶的残留量.本方法的线性范围为5～ 200 U/kg,定量限为5 U/kg,回收率为89.6％～ 108.2％,相对标准偏差为3.3％ ～4.9％.采用本方法对市售蜂蜜和大米糖浆共38个样本进行了考察,γ-淀粉酶的检出率为76.3％.为了进一步验证本方法的检测能力,测定了掺入15％(质量分数)大米糖浆的蜂蜜样品,测得γ-淀粉酶的含量为10.2 U/kg.本方法能够有效地从酶学的角度鉴定蜂蜜中是否含有大米糖浆.
关键词:
液相色谱-同位素质谱联用法
,
凝胶柱色谱
,
酶反应
,
γ-淀粉酶
,
大米糖浆
,
掺假
,
蜂蜜
