宋乐天
,
于广利
,
赵峡
,
高昊东
,
杨晓华
,
杨海
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2007.03.014
以4种不同蛋白质含量的灰树花β-1,3/1,6-葡聚糖(GF1,GF2,GF3,GF4)和1种α-1,4/1,6-葡聚糖(P100)为研究对象,探讨了它们在不同盐浓度和不同pH下的高效凝胶渗透色谱(HPGPC)行为.结果表明:灰树花β-葡聚糖相对分子质量在低于0.025 mol/L的氯化钠溶液中急剧降低,在0.1～0 2 mol/L的氯化钠溶液中趋于平稳.在pH 3～6时,其相对分子质量随pH增加而急剧增加;在pH 6～9范围内变化较小;pH高于9后又稍微增加.在相同条件下,α-1,4/1,6-葡聚糖的相对分子质量不受盐浓度和pH值变化的影响.灰树花β-葡聚糖在水溶液中可形成超螺旋结构,该结构受溶液盐浓度和pH值变化的影响,导致分子聚集状态不同,从而呈现不同的凝胶渗透色谱行为,表现为相对分子质量升高或降低.
关键词:
高效凝胶渗透色谱
,
相对分子质量
,
聚集状态
,
β-葡聚糖
,
灰树花
田振华
,
张昊
,
于源华
应用化学
doi:10.11944/j.issn.1000-0518.2016.06.150325
通过基因重组技术,克隆表达了β-葡聚糖特异性结合美洲鲎G因子α亚基片段a(Gαa)蛋白,并建立了β-葡聚糖比浊检测方法.克隆的Gαa基因相对分子质量为40000(1251 bp),浓度为2 g/L,纯度达到98％以上.该蛋白能与βG特异性结合,紫外分光光度计在340 nm下检测的吸光度与βG含量呈正线性相关,线性范围3.125 ～200 mg/L,R2=0.997,检测限3.125 mg/L.结合力实验表明,该蛋白与βG具有良好的亲和性及特异性.该方法具有成本低、快速、专一性强等特点.
关键词:
美洲鲎G因子α亚基片段a特异性蛋白
,
β-葡聚糖
,
比浊法
