黎源倩
,
王国庆
,
米建萍
,
周颖
,
曾红燕
,
张朝武
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2005.01.024
建立了毛细管电泳分离-激光诱导荧光检测(CE-LIFD)分析分枝杆菌脱氧核糖核酸(DNA)限制性内切酶谱的新方法.用聚合酶链反应(PCR)扩增分枝杆菌hsp65基因的长度为439 bp的片段,该扩增片段经限制性内切酶BstEⅡ和HaeⅢ酶切后,分别用CE-LIFD装置和常规琼脂糖电泳(AGE)对比检测酶切片段.对PCR扩增片段的酶切样品的预处理和CE条件进行了优化,获得了8种分枝杆菌DNA的限制性内切酶谱图.DNA片段相对迁移时间的相对标准偏差(RSD)≤3.6%.结果表明,CE的分离效能明显高于AGE,是研究DNA限制性内切酶谱的更有效的检测手段.
关键词:
毛细管电泳
,
激光诱导荧光检测
,
限制性内切酶谱
,
分枝杆菌
邹晓莉
,
黎源倩
,
毛红霞
,
曾红燕
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2005.03.012
建立了消毒剂中活性成分醋酸氯己定(又名:醋酸洗必泰)的毛细管电泳快速检测法.采用15 mmol/L磷酸盐-乙腈(体积比为60∶40)缓冲体系,将醋酸氯己定在50 cm×75 μm i.d.的石英毛细管柱中进行电泳分离,电泳电压为15 kV,检测波长为254 nm.同时,对毛细管电泳分析醋酸氯己定的条件(如缓冲液的种类、pH值、浓度及电泳电压等)进行了优化.用该方法对消毒剂样品进行测定,在4 min内可完成分析.醋酸氯己定在质量浓度为0.01～0.10 g/L时线性良好,检测限为0.004 mg/L,吸光度值的相对标准偏差为3.97% ,迁移时间的相对标准偏差为2.99% ,样品加标回收率为91.4% ～116.6% .将该方法与高效液相色谱法进行比较,两种方法测定结果的相对误差≤4% .所建立的检测醋酸氯己定含量的毛细管区带电泳法简单、快速,适用于消毒剂样品的测定.
关键词:
毛细管电泳
,
醋酸氯己定
,
消毒剂
邹晓莉
,
黎源倩
,
曾红燕
,
周健
,
秦廷武
,
莫湘涛
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2006.03.012
建立了测定人肌腱中胶原蛋白含量的高效液相色谱法.动物肌腱中的胶原蛋白经酸水解后生成包括羟脯氨酸在内的氨基酸混合物,用2,4-二硝基氯苯对水解产物衍生化,然后以0.01 mol/L乙酸钠-乙酸缓冲液(pH 6.0)-乙腈(体积比为80∶20)为流动相,经反相C18柱分离,紫外检测器于360 nm波长处检测来测定羟脯氨酸的含量.羟脯氨酸是胶原蛋白的特异性氨基酸且含量稳定,因而可通过样品中羟脯氨酸的含量来计算胶原蛋白的含量.该方法对羟脯氨酸的检出限为3 μg/L,羟脯氨酸为3 μg/L～100 mg/L时与峰面积的线性关系良好;样品测定的相对标准偏差为1.95% ,加标回收率为98.4% ～110.8% .对60份人肌腱样品中胶原蛋白的含量进行了测定.所建立的方法灵敏、准确、干扰少,适用于肌腱中胶原蛋白含量的测定.
关键词:
高效液相色谱法
,
羟脯氨酸
,
胶原蛋白
,
肌腱
王和兴
,
黎源倩
,
雍莉
,
谷素英
,
杨小琪
,
李磊
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2007.04.019
建立了大豆和大米中磺酰脲类和二苯醚类除草剂多残留同时检测的高效液相色谱分析方法.样品经乙腈提取,正己烷液-液分配,C18固相萃取小柱净化后,采用高效液相色谱方法分离,以乙腈-三乙胺盐酸溶液作流动相,梯度洗脱,紫外检测器检测.对样品前处理和色谱分析条件进行了优化,8种除草剂(甲磺隆、氯磺隆、苄嘧磺隆、吡嘧磺隆、三氟羧草醚、精恶唑禾草灵、乙氧氟草醚、乙羧氟草醚)在0.05～2.0 mg/L范围内线性关系良好.方法的定量限(S/N=10)为0.01～0.02 mg/kg,能达到国家有关上述除草剂残留限量的要求.大豆和大米样品的平均加标回收率分别为91.6%～116.1%和76.6%～110.8%,相对标准偏差(RSD)为1.0%～12.2%.所建立的方法在30min内可完成一次检测,具有简便快速、灵敏可靠的特点,适用于大豆和大米中除草剂多残留的测定.
关键词:
高效液相色谱法
,
固相萃取
,
除草剂残留
,
磺酰脲类除草剂
,
二苯醚类除草剂
,
大豆
,
大米
毛红霞
,
黎源倩
,
裴晓方
,
何超
,
渠凌丽
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2007.04.005
建立了食品中常见致病菌大肠杆菌O157:H7的uidA基因、沙门菌的invA基因和志贺菌的ipaH基因的多重聚合酶链反应(PCR)产物的毛细管电泳快速检测方法.根据这3种致病菌的特异性基因序列设计多重PCR引物,优化PCR扩增反应体系,采用7.0 g/L甲基纤维素为筛分介质,毛细管电泳-激光诱导荧光检测法同时检测了3种常见致病菌的PCR扩增产物.在优化的多重PCR反应和毛细管筛分电泳条件下,该方法可以同时检测沙门菌、志贺菌和大肠杆菌O157:H7基因的多重PCR扩增产物,22 min内即可完成3种常见致病菌的毛细管电泳检测.迁移时间的相对标准偏差为1.47%～2.07%.与凝胶电泳法比较,该法简便快速,灵敏度高,可用于多种致病菌脱氧核糖核酸的检测,为食品安全提供了一种可靠的快速检测方法.
关键词:
多重聚合酶链反应
,
毛细管电泳法
,
激光诱导荧光检测
,
食源性致病菌
刘红河
,
黎源倩
,
孙成均
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2002.01.025
采用环氧树脂作为固相涂层制作固相微萃取(SPME)装置,建立了顶空固相微萃取-气相色谱法(HS-SPME-GC)测定酒精饮料中甲醇和杂醇油的方法,并对萃取条件和色谱条件进行了优化。方法的检出限为0.02 mg/L～0.04 mg/L,相对标准偏差为1.4%～4.1%;与顶空气相色谱法相比,灵敏度可提高20倍～300倍。将该法用于啤酒、葡萄酒和保健酒中的甲醇和杂醇油的测定,加标回收率为80.8%～110.3%;与顶空气相色谱法(国家标准方法)进行了比较,相对误差不大于7.3%。该法简便、快速、灵敏、精密度好,拓宽了SPME的应用范围。
关键词:
固相微萃取
,
气相色谱
,
甲醇
,
杂醇油
肖全伟
,
黎源倩
,
吴德生
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2004.06.003
建立了大鼠组织中双酚A和4-壬基酚的提取和含量测定方法.大鼠组织样品经甲醇-乙酸铵缓冲液匀浆、正己烷-乙醚混合溶剂提取、氮气吹干后用流动相溶解,以乙腈-0.01 mol/L乙酸铵缓冲液(pH 4.5)(体积比为75∶25)为流动相,经C18色谱柱分离,在激发波长227 nm、发射波长313 nm下进行荧光检测.大鼠心、脑、肝和肾脏组织样品中,双酚A的检出限为3.2～4.6 ng/g,4-壬基酚的检出限为11.8～15.6 ng/g;日内检测精密度为0.89% ～4.50% ,日间检测精密度为3.10% ～12.40% ;不同剂量的加标回收率为81.2% ～96.5% ,相对标准偏差小于5.28% .该方法简便快速,灵敏可靠,适用于动物组织中环境类激素双酚A和4-壬基酚含量的同时检测.
关键词:
高效液相色谱法
,
4-壬基酚
,
双酚A
,
大鼠组织
