陈义烘
,
黄慧敏
,
李任强
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2007.03.009
环节动物的S型凝集素在结构和生化性质上都有别于一般的S型凝集素,其在抗癌等研究方面的潜在价值重大.根据环节动物S型凝集素的性质,采用惰性分子筛填料Sepharose CL-6B(琼脂糖凝胶CL-6B)作为亲和色谱介质对蚯蚓S型凝集素进行了纯化.以2 mmol/L乙二胺四乙酸(EDTA)-MEPBS(4 mmol/L β-巯基乙醇,150mmol/L NaCl,20 mmol/L磷酸盐,pH 7.2)溶液作为平衡液,以氨水(150 mmol/L,pH 10.5)作为洗脱液得到的蛋白质经SDS-PAGE(十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳)、凝血实验及荧光检测等证明了其即为蚯蚓S型凝集素.该方法只需一个步骤即可从蚯蚓提取液中分离到纯的S型凝集素,比传统方法更加快捷高效,优越性明显.该方法的应用将有利于对环节动物S型凝集素的深入研究.
关键词:
琼脂糖凝胶CL-6B
,
亲和色谱
,
一步纯化
,
S型凝集素
,
蚯蚓
