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硅片载体表面形貌对蛋白质吸附的影响

文九巴 , 樊丽梅 , 赵胜利 , 高春芳 , 宋国英

功能材料

采用固定金属离子亲和技术在不同表面形貌的硅基片上交联金属离子螯合物,蛋白质分子通过其末端的组氨酸标记(His-tag)与金属离子螯合,定向结合于硅基片表面构成蛋白质芯片,考察了不同表面形貌的硅基片对蛋白质的吸附行为.结果表明:硅基片的表面形貌对蛋白质的吸附行为有很大影响.硅基片经碱蚀刻获得的绒面氧化后因其较大的比表面积、特殊的空间结构及较小的固液接触角θ,对蛋白质具有较强的吸附能力,螯合的蛋白质种类多、丰度大.

关键词: 氧化硅载体 , 表面形貌 , 吸附 , 蛋白质芯片

磷酸盐洗脱液再生IMAC-Cu蛋白质芯片

蔡羽 , 杜涛 , 赵胜利 , 高春芳

应用化学 doi:10.3724/SP.J.1095.2011.00211

使用扫描电子显微镜(SEM)和蛋白质芯片检测系统考察了磷酸盐洗脱液pH值和竞争洗脱剂对IMAC-Cu蛋白质芯片再生的影响.结果表明,随着磷酸盐洗脱液pH值降低,芯片所吸附的蛋白质越容易被去除,但对芯片表面化学结构的破坏也随之加剧.在洗脱液中加入竞争洗脱剂乙二胺四乙酸(EDTA)或甘氨酸(Gly)可有效改善蛋白质的洗脱效果.当磷酸盐洗脱液pH=6.5、竞争洗脱剂为0.02 mol/L EDTA、洗脱时间72 h时,芯片的再生效果最佳.

关键词: 蛋白质芯片 , 磷酸盐洗脱液 , 再生

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