赵晶
,
鞠鑫
,
潘江
,
李春秀
,
王敏杰
,
许建和
催化学报
doi:10.3724/SP.J.1088.2012.10832
对已公布的全基因组进行检索发现,杨树(Populus tomentosa)至少含有24个预测为可溶性环氧水解酶的基因.从中选取了7个可能的环氧水解酶基因进行克隆,通过扩增得到其中5个毛白杨(Populus tomentosa Carr)环氧水解酶基因.序列分析显示,它们与已克隆的巨大芽胞杆菌环氧水解酶的同源性仅为24％～26％.对该系列基因进行了在E.coli中的异源表达,并将得到的5个环氧水解酶(PTEH 1～5)用于缩水甘油苯基醚和对硝基苯乙烯氧化物的酶促水解反应.结果发现,其中3个重组酶具有显著的环氧水解酶活性.进一步研究表明,PTEH1和PTEH2对于缩水甘油苯基醚显示了一定的反常规的(R)-选择性,而PTEH5则优先水解(S)-构型的缩水甘油苯基醚.因此,毛白杨中环氧水解酶表现出多样性.
关键词:
毛白杨
,
环氧水解酶
,
异源表达
,
缩水甘油苯基醚
,
对硝基苯乙烯氧化物
,
催化拆分
鞠鑫
,
潘江
,
许建和
催化学报
利用绿豆环氧水解酶催化(R,S)-对硝基苯乙烯氧化物水解,产物(R)-对硝基苯乙二醇的产率超过常规酶促拆分的极限产率(50%), 表明发生了对映体会聚. 采用绿豆粉剂和粗酶制剂考察了不同条件下的生物催化反应,结果表明,添加吐温-80 作为分散剂对反应有促进作用. 对该酶的固定化进行了初步研究,发现酶经硅藻土吸附固定化后稳定性显著增加. 在克级规模制备实验中,产物的总产率达73.3%;产物经一步重结晶,得到了光学纯度大于99%的(R)-对硝基苯乙二醇.
关键词:
绿豆
,
环氧水解酶
,
对硝基苯乙烯氧化物
,
对映归一性水解
,
(R)-对硝基苯乙二醇
