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定向进化提高枯草芽孢杆菌脂肪酶的活力

赵博 , 陶进 , 马吉胜 , 廉虹 , 王岩 , 常琳 , 高仁钧 , 曹淑桂

催化学报

通过定向进化的方法, 提高了一个新的源于枯草芽孢杆菌 (Bacillus subtilis) 的脂肪酶 (BSL2) 的活力. 经过两轮易错 PCR 以及高通量筛选, 最终获得了比活力为野生出发酶 4.5 倍的突变体 3-1B2. 基因比对结果表明, 共有两个氨基酸发生了突变. 突变酶的酶学性质研究发现, 与野生酶相比, 它的热稳定性及 pH 稳定性略有增加, 最适温度和最适 pH 值则无太大的变化. 同源模建了 BSL2 与 3-1B2 的结构, 并与底物进行了分子对接. 结果表明, 突变体 3-1B2 的结合能比野生型 BSL2 低 1.29 kcal/mol, 活性中心 Ser77 残基与底物羰基的距离也由 0.319 nm 减小为 0.278 nm, 因而加快了酶反应速度, 提高了酶活力.

关键词: 枯草芽孢杆菌 , 脂肪酶 , 易错聚合酶链反应 , 定向进化 , 分子对接

湘钢135t钢包底吹氩透气砖布置位置优化研究

曾昆 , 唐利民 , 金明 , 张华 , 陶进

耐火材料 doi:10.3969/j.issn.1001-1935.2015.04.012

针对湘钢135 t 钢包由于底吹氩造成的侵蚀较快的问题,在砖布置位置原方案的基础上提出了两种透气砖布置位置优化方案(方案二和方案三)。建立了钢包底吹氩工艺的三维非稳态数学模型,研究了透气砖布置位置对钢液流场、钢液混匀时间以及钢液对钢包壁面切应力的影响,并进行了工业对比试验。结果表明:1)透气砖布置位置的调整对钢液流场影响不大,原方案的钢液混匀时间略短些;2)方案三中钢液对钢包壁面切应力最小,切应力平均值和最大值分别为原方案的1/2和1/4;3)工业试验结果表明,各方案中钢液混匀效果基本相同,但方案三的钢包侵蚀速率最小,包龄由原来的41.0次提高到46.5次。

关键词: 钢包 , 底吹氩 , 透气砖布置 , 数值模拟

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