徐立华
,
王世祥
,
郑晓晖
,
边六交
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2010.00374
β2-肾上腺素能受体是细胞表面受体的一种,它能通过偶联异源三聚体G蛋白将信号转导引入到细胞内部.本实验在成功克隆、表达β2-肾上腺素能受体的基础上,建立了一种两步柱色谱分离纯化目的蛋白质的方法.首先利用Ni2+螯合的高分辨纯化的预带电荷介质Sepharose High Performance与含有六聚组氨酸标签的蛋白质特异结合的性质,对目的蛋白质进行初步分离,接着运用快流速Q琼脂糖凝胶(Quaternary Sepharose Fast Flow)对其进行进一步的分离纯化.采用该方法得到的β2-肾上腺素能受体蛋白质经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和高效凝胶排阻色谱检测其纯度约为95%.结果表明该方法可以对重组猪β2-肾上腺素能受体进行有效的分离纯化.
关键词:
柱色谱
,
分离
,
纯化
,
β2-肾上腺素能受体
王小芳
,
王芳
,
张亚环
,
郑晓晖
应用化学
doi:10.3969/j.issn.1000-0518.2007.03.013
利用GC/MS法跟踪分析了苍术酮纯品的分解过程,得到5种分解产物--与文献报道的苍术酮转变成2种产物存在较大的差异;研究了苍术酮的氧化反应机理:苍术酮与水易进行1,4加成反应,生成半羧醛羟基.水的存在使半羧醛羟基开环并导致C-O键断裂,生成羰基,羰基进一步被氧化成羧基.由于羧基上的碳原子为sp2杂化,羟基可从杂化轨道平面两侧进攻羧基,并与羧基进行分子内脱水反应,故而可生成白术内酯Ⅰ及表白术内酯Ⅰ,而白术内酯Ⅰ的7位C上的-H很活泼,易被-OH取代而生成白术内酯Ⅲ,白术内酯Ⅲ不稳定,易使分子内脱水生成白术内酯Ⅱ.此外,白术内酯Ⅲ与白术内酯Ⅰ可进行分子间脱水反应,生成双白术内酯.通过定量分析纯品和白术原药材中苍术酮在氧化过程中的相对含量,计算反应的动力学参数,得出苍术酮纯品的反应速率方程为Rate1=k'1[x]1.84,活化能为58.05 kJ/mol;原药材中苍术酮的反应速率方程为Rate2=k'2[x]1.89,活化能为63.17 kJ/mol.
关键词:
白术挥发油
,
苍术酮
,
动力学方程
,
活化能
,
反应机理
