周勃
,
边六交
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2008.03.025
为了从猪血中分离纯化高纯度的猪血红蛋白,建立了通过超滤、DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换色谱和Sephadex G-75凝胶排阻色谱三步法制备高纯度猪血红蛋白的方法,并通过十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、高效凝胶排阻色谱和反相高效液相色谱方法,对纯化后的猪血红蛋白进行了鉴定.经三步分离纯化后,猪血红蛋白的纯度大于99% ,含量为1.328 g/L.
关键词:
超滤
,
阴离子交换色谱
,
凝胶排阻色谱
,
猪血红蛋白
,
分离
,
纯化
徐立华
,
王世祥
,
郑晓晖
,
边六交
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2010.00374
β2-肾上腺素能受体是细胞表面受体的一种,它能通过偶联异源三聚体G蛋白将信号转导引入到细胞内部.本实验在成功克隆、表达β2-肾上腺素能受体的基础上,建立了一种两步柱色谱分离纯化目的蛋白质的方法.首先利用Ni2+螯合的高分辨纯化的预带电荷介质Sepharose High Performance与含有六聚组氨酸标签的蛋白质特异结合的性质,对目的蛋白质进行初步分离,接着运用快流速Q琼脂糖凝胶(Quaternary Sepharose Fast Flow)对其进行进一步的分离纯化.采用该方法得到的β2-肾上腺素能受体蛋白质经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和高效凝胶排阻色谱检测其纯度约为95%.结果表明该方法可以对重组猪β2-肾上腺素能受体进行有效的分离纯化.
关键词:
柱色谱
,
分离
,
纯化
,
β2-肾上腺素能受体
吴鹏
,
杨晓燕
,
边六交
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2004.01.001
为了能从中华眼镜蛇蛇毒中简单快速地分离纯化神经生长因子(一种治疗各种神经性损伤和神经退行疾病的药物,简称NGF),采用不同的色谱柱联用的方式对NGF的纯化工艺进行了研究.结果表明,采用DEAE-Sepharose F.F.和Sephadex G-50二步柱色谱工艺可以从蛇毒中快速分离得到神经生长因子.经十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳和反相高效液相色谱分析, 证明所得到的NGF为单一组分,相对分子质量约为29 000.对8 d龄鸡胚背根神经节采用体外培养法,结果证明,所得NGF具有明显的促进神经纤维生长的生物活性.
关键词:
阴离子交换色谱
,
凝胶排阻色谱
,
神经生长因子
,
中华眼镜蛇蛇毒
,
分离
,
纯化
边六交
,
杨晓燕
,
刘莉
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2006.02.006
建立了一种用CM Sepharose CL-6B阳离子交换、DEAE Sepharose Fast Flow阴离子交换和Sephadex G-75凝胶排阻三步柱色谱从江浙蝮蛇蛇毒中分离纯化类凝血酶的方法.在实验室小柱分离方案的基础上,对该纯化工艺进行了放大.当上样量达实验室小柱的25倍时,所得类凝血酶的质量指标与实验室小柱基本一致.采用该法所得的蝮蛇类凝血酶经Shim-pack Diol-300高效凝胶排阻柱测得其相对分子质量约为33 500,用Shim-pack VP-ODS反相色谱柱检测其纯度约为96% .从江浙粗蛇毒中提取类凝血酶时,类凝血酶的总质量收率约为0.3% ,总活性收率约为64% ,比活可达2 000 U/mg.
关键词:
三步柱色谱
,
类凝血酶
,
蛇毒
,
江浙蝮蛇
,
分离纯化
马丽娜
,
吴丹
,
边六交
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2012.03022
Kringle 5是血纤维蛋白溶酶原中特异抑制内皮细胞增生和迁移活性最高的一种血管生成抑制剂.该实验在前期成功克隆和表达可溶性非融合血管生成抑制剂Kringle 5的基础上,建立了一种两步色谱法分离纯化Kringle5的方法.首先用SP Sepharose Fast Flow强阳离子交换色谱柱对Kringle 5重组菌体破碎上清液进行初步分离,然后再用丙烯葡聚糖凝胶S-100 HR凝胶排阻色谱柱对其进行进一步的纯化.采用本方法得到的可溶性非融合血管生成抑制剂Kringle 5经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳和高效凝胶排阻色谱检测其纯度大于98％,通过鸡胚尿囊膜法确定这种蛋白质具有抑制内皮毛细血管生长的活性.
关键词:
阳离子交换色谱
,
凝胶排阻色谱
,
血管生长抑制剂Kringle 5
,
分离
,
纯化
