张娟红
,
王荣
,
谢华
,
孟宪栋
,
贾正平
,
马骏
,
张军莉
,
王娟
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2011.00026
建立正相液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)分离普萘洛尔对映体的方法,并用于盐酸普萘洛尔片对映体含量测定.样品使用甲醇进行简单提取,采用Chiralcel OD-H手性柱,以正己烷-乙醇-氨水(70∶30∶0.4, v/v/v)为流动相,流速为0.4 mL/min.在正离子模式下,通过电喷雾离子化(ESI+),采用多反应监测(MRM)方式进行检测,用于定量分析检测的离子对为m/z 260.2→116.0,在20 min内完成普萘洛尔对映体定量分析.盐酸普萘洛尔对映体在2.5～1000 μg/L 质量浓度范围内线性关系良好,定量限为2.5 μg/L;日内及日间测定的相对标准偏差小于2.64% .两种对映体的加样回收率范围分别为99.08% ～102.58%和100.21% ～103.16% .该方法准确、简便、可靠、有效,可用于盐酸普萘洛尔片对映体的质量控制.
关键词:
正相液相色谱-串联质谱
,
手性分离
,
测定
,
普萘洛尔对映体
武晓玉
,
王荣
,
谢华
,
王剑锋
,
杨沛
,
贾正平
,
张强
,
王先华
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2012.03043
通过在硅烷化硅胶内表面和外表面分别键合己胺和聚乙烯醇,制备了能够在线直接进样分析生物样品的新型内表面反相限进填料.采用元素分析、电镜观察对该限进填料的结构进行了表征.以普萘洛尔、阿替洛尔、苯巴比妥、卡马西平作溶质探针,并以Merck公司生产的限进填料柱作参比,对合成的限进填料的色谱性能进行了研究.研究结果表明,所制备的限进填料有较好的蛋白质排阻能力、富集能力和反相色谱性能,能同时实现排阻生物大分子杂质和富集小分子被分析物的功能,可作为在线、快速直接进样检测分析生物样品的预处理柱,适用于普萘洛尔血浆的直接进样分析.
关键词:
内表面反相限进填料
,
制备
,
评价
,
高效液相色谱法
,
普萘洛尔
,
血浆
张晓惠
,
王荣
,
谢华
,
尹强
,
李晓云
,
贾正平
,
武晓玉
,
张娟红
,
李文斌
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2012.11021
以自制的限进性填料柱为预处理富集柱,Luna C18柱为分析柱,通过柱切换技术将限进性填料柱与高效液相色谱联用(RAM-HPLC),研究了盐酸贝那普利的在线富集效果.考察了进样体积与峰面积、系统总压力的关系,以及常规进样与大体积进样的差别.当进样体积在100 μL以内时,峰面积随进样体积的增加而增加；当进样体积大于80 μL时,系统总压力变化明显.考虑对整个系统的保护,选择80μL作为最大进样体积.同一浓度的样品进样20μL与进样80 μL所得峰面积之间的线性关系良好.RAM柱对盐酸贝那普利具有良好的富集作用,能够有效提高HPLC的灵敏度,而且具有简单、经济的特点.
关键词:
限进性填料
,
高效液相色谱
,
在线富集
,
直接进样
,
盐酸贝那普利
,
血样
王荣
,
谢景文
,
贾正平
,
胡晓丽
,
谢华
,
李永民
,
陈立仁
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2001.06.011
运用正相高效液相色谱-手性配位基交换流动相法,通过流动相中添加L-脯氨酸、醋酸铜及三乙胺,对人血清中甲状腺素对映体(D-,L-T4)进行了测定.在所建立的色谱条件下,D-,L-T4异构体得到基线分离.该法用于测定甲状腺机能亢进(甲亢)、甲状腺机能减退(甲低)患者血清中的D-,L-T4的浓度,可为临床用药提供理论依据,对疾病的治疗起到了积极的作用.
关键词:
高效液相色谱
,
手性配位基交换流动相
,
甲状腺素对映体
,
人血清
武晓玉
,
王荣
,
谢华
,
王剑锋
,
贾正平
,
张强
,
王先华
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2011.01205
建立了快速检测大鼠血浆中普萘洛尔对映体浓度的柱切换-高效液相色谱法.将自制限进填料柱作为预处理柱,通过直接进样方式,使普萘洛尔对映体在预处理柱上保留,同时除去血浆中的蛋白质等大分子；再通过柱切换技术,使普萘洛尔对映体在键合型纤维素-三(3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯)(Chiralcel OD-RH)分析柱上得到手性拆分.通过条件优化,确定切换前预处理流动相为硼酸盐缓冲液(pH 8.5)-甲醇(95:5,v/v),流速为1.0mL/min；切换后分析流动相为异丙醇-乙醇-0.2 mmol/L硼酸盐缓冲液(pH 8.5)(30:30:40,v/v/v),流速为0 8mL/min;切换时间为3 min；柱温为25℃；检测波长为293 nm.普萘洛尔两对映体在25～500mg/L的质量浓度范围内具有良好的线性关系(r=0.999 5),3个加标水平(50、100、250mg/L)的平均回收率为97.89％ ～101.56％,日内和日间精密度均小于5％.该方法简便、快速、灵敏、准确,适于血浆样本中手性药物的药代动力学研究.
关键词:
柱切换
,
限进填料
,
高效液相色谱
,
普蔡洛尔对映体
,
大鼠血浆
,
药代动力学
郝颖
,
王荣
,
尹强
,
谢华
,
李文斌
,
贾正平
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2013.04045
胃癌是临床常见的恶性肿瘤之一.近年来寻找肿瘤相关特异蛋白质是蛋白质组学研究的热点.本文通过考察毛细管动态涂层方法、筛分介质聚环氧乙烷(PEO)的浓度、缓冲液的pH值、分离电压、温度及荧光染料对分离效果的影响,建立了毛细管电泳-激光诱导荧光法分离胃癌组织及癌旁正常组织蛋白质的方法；通过分离检测,获得两者的蛋白质指纹图谱.经分析,两者的指纹图谱相似度达到0.8以上,差异蛋白质分子质量集中在50 000 ～100 000 Da之间,提示某些小分子蛋白质可能是和肿瘤发生相关的特异蛋白质,从而缩小了特异性分子标记物的筛选范围.病理组织学分型及蛋白质电泳峰数目的统计结果验证了该方法的可靠性.该方法具有临床应用的潜力.
关键词:
毛细管电泳
,
激光诱导荧光检测
,
蛋白质
,
差异性
,
胃癌组织
,
癌旁正常组织
石冬琴
,
王荣
,
谢华
,
田薇
,
贾正平
,
郭建魁
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2012.12023
通过对PCR扩增的76例结直肠癌组织及癌旁正常组织DNA基因组共152个样本纯化变性后,采用毛细管电泳-激光诱导荧光检测(CE-LIF)结合单链构象多态性(SSCP)分析方法检测了人结直肠癌组织及癌旁正常组织中K-ras基因第12/13位密码子突变.所检测的76例结直肠癌患者中有30例患者存在基因突变,并对异常片段进行测序验证,测序证实以碱基G→A点突变为主.结果表明所建立的CE-LIF技术结合SSCP分析检测K-ras基因突变的方法高效、快速、灵敏、准确,适合于临床上大样本结直肠癌中K-ras基因突变分析,对选择抗结直肠癌药物有一定的指导作用.
关键词:
毛细管电泳
,
K-ras基因
,
单链构象多态性
,
基因突变
,
结直肠癌组织
