秦宗华
,
陈婷
,
李任强
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2012.04002
动物血清中免疫球蛋白和白蛋白的等电点分别约为7.8和4.8,根据它们等电点的较大差别,利用Q SepharoseTM-xL强阴离子交换色谱结合分子排阻色谱同时分离纯化这2种蛋白.以0.02 mol/L pH 8.0的Tris-HCl缓冲液平衡离子交换色谱柱并将已稀释10倍的高免疫的兔血清上样,采用pH分段洗脱.在pH 6.0时以0.3mL/min低流速洗脱得到高纯度的免疫球蛋白,继续在pH 4.0时洗脱,再辅以Sephadex G-75分子排阻色谱可获得纯度大于95％的白蛋白.对纯化后的蛋白进行活性检测,证明所纯化的免疫球蛋白和白蛋白都保持正常的生物活性.蛋白质含量测定说明免疫球蛋白的纯化回收率达到95％以上,而白蛋白的纯化回收率大于90％.该法简便快速,可同时从动物血清中纯化出保持生物活性的免疫球蛋白和白蛋白,纯化效率高.
关键词:
阴离子交换色谱
,
分子排阻色谱
,
免疫球蛋白
,
白蛋白
,
动物血清
,
纯化
