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核磁共振法研究大肠杆菌细胞内La3+与钙调蛋白的相互作用

杨秦 , 刘会雪 , 李勤 , 杨晓达 , 王夔

中国稀土学报

应用in-cell和cell free 核磁共振(NMR)方法分别研究了柠檬酸镧与大肠杆菌细胞内15N标记的钙调蛋白(CaM) 以及La3+和大肠杆菌无细胞提取液(Cell free extract, CFE)的相互作用.将所得1H-15N HSQC NMR谱与纯化过的以不同组成比结合Ca/La的CaM的1H-15N HSQC NMR谱比较, 发现在细胞内因胞内环境拥挤, 蛋白运动能力下降, 使CaM 的NMR信号较少且峰宽增加.而柠檬酸镧可以透过细胞膜进入细胞, 并与胞内的CaM结合.无细胞提取液的NMR谱显示, 加镧之前细胞内CaM主要以Ca结合态存在, 而加入La3+可能形成Ca2La2CaM混合金属配合物.这和无细胞的化学体系的实验结果一致.实验结果显示, 细胞水平NMR方法可用于研究稀土以至其他金属配合物与细胞的相互作用如何与细胞内钙调蛋白作用, 以及有关的生物功能.

关键词: 钙调蛋白 , La3+ , in-cell NMR , 稀土

稀土离子对大鼠肝细胞核脂质过氧化的影响

黄沛力 , 红枫 , 陈怡 , 王夔 , 李荣昌

中国稀土学报

用光度法测定丙二醛(MDA)研究不同浓度La3+,Ce3+,Pr3+,Nd3+,Eu3+对大鼠肝细胞核脂质过氧化的影响. 结果表明: 稀土离子在1×10-4~1×10-6 mol*L-1浓度范围内能抑制振荡温育或H2O2引起的脂质过氧化, 且与浓度正相关. 但是对大鼠肝细胞核用稀土离子处理一定时间,稀土离子Eu3+对脂质过氧化的抑制作用明显减弱, 甚至会导致脂质过氧化加强.

关键词: 稀土 , 脂质过氧化 , 肝细胞核

MTT法测定稀土离子对BEL-7402及K562细胞的毒性及增殖毒性

红枫 , 黄沛力 , 王夔 , 李荣昌

中国稀土学报

用MTT法测定稀土离子在不同浓度、不同培养液中, 与BEL-7402 和K562细胞作用不同时间, 对细胞的毒性和增殖毒性. 结果表明, 在含10%小牛血清培养液中, 仅个别稀土离子在较高浓度时对BEL-7402细胞增殖有较弱的抑制作用; 对于K562细胞, 稀土离子在低浓度时对细胞增殖即表现出较强的抑制作用(P<0.05). 当培养液不含小牛血清时, 较低浓度的稀土离子即可抑制BEL-7402 细胞的增殖(P<0.05).

关键词: 细胞生物学 , 癌细胞 , 白血病细胞 , 肝癌细胞 , MTT法 , 稀土

镧对肝细胞株7701的增殖和对蛋白质表达的影响

刘会雪 , 杨晓达 , 王夔

中国稀土学报

采用MTT法考察了La3+在2×10-4~4×10-7 mol·L-1浓度范围内对体外培养的人正常肝细胞株7701的生长和增殖的影响及其对浓度的依赖关系.结果表明,低浓度的La3+对细胞有明显的促增殖作用,而高浓度的La3+对细胞的生长表现抑制作用.为探讨促增殖的细胞是否正常,利用双向凝胶电泳技术,对La3+诱导增殖的细胞和对照组正常细胞进行蛋白质分离和分析,发现两组细胞蛋白质的表达存在着明显的差异,表示在稀土促进增殖下的细胞可能并非正常,并讨论了La3+促进细胞增殖的可能机制及其过程.

关键词: 稀土生物效应 , 增殖 , 蛋白质组 , 双向凝胶电泳 , 稀土

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