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高效液相色谱-荧光检测法测定血清中的犬尿氨酸

罗昔波 , 唐爱国 , 皮兰敢 , 肖乐东 , 敖翔 , 卜艳红 , 王瑞

色谱 doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2008.01.012

建立了高效液相色谱-荧光检测(HPLC-FLD)测定血清中犬尿氨酸(kynurenine,Kyn)含量的方法.采用Hypersil C8色谱柱(300 mm×6.0 mm,10 μm),流动相为0.25 mol/L醋酸锌及50 mmol/L醋酸溶液(含3%乙腈),流速为1.5 mL/min,荧光检测激发波长和发射波长分别为365 nm和480 nm.血清标本经5%(v/v)高氯酸溶液去除蛋白质后取上层清液直接进样,Kyn经流动相等度洗脱分离后,用FLD进行测定.研究结果表明Kyn保留时间约为8.3 min,线性范围为0.098~19.6 μmol/L,最低检出浓度为0.04 μmol/L,回收率为90.8%~96.2%,日内、日间测定的相对标准偏差均小于5%,苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸、5-羟色胺和犬尿喹啉酸等物质对犬尿氨酸的测定均无干扰.建立的方法简便、快速、灵敏、特异,适用于临床和科研应用.

关键词: 高效液相色谱法 , 荧光检测 , 犬尿氨酸 , 人血清

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