杨武
,
陈淼
,
康经武
,
欧庆瑜
,
康敬万
,
高锦章
冶金分析
doi:10.3969/j.issn.1000-7571.1999.05.013
对f-f跃迁光谱在分析化学中的应用进展进行了简要的总结,详细地介绍了根据超灵敏跃迁强度变化规律测定溶液中镧系配合物的组成、形成常数及测定混合稀土中单一稀土的原理和方法.
关键词:
f-f跃迁光谱
,
镧系元素配合物
,
组成测定
,
形成常数
,
综述
吴艳芳
,
李晓鸽
,
车铁军
,
朱智甲
,
康经武
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2011.10005
建立了用于分离并定量测定低分子量硫酸化多糖中不同糖链数的各个组分分布比例的体积排阻色谱方法.系统考察了流动相的组成、离子强度和pH值、流速、柱温等因素对分离的影响.最佳分离条件:两支TSK-GELG2000 SWxl色谱柱(300 mm×7.8 mm)串联,流动相100 mmol/L Na2HP04-NaH2PO4(pH 7.0),流速0.5mL/min,柱温35℃,进样量5μL,样品质量浓度10 g/L.在最佳的分离条件下,可以将低分子量硫酸化多糖样品中不同糖链数的各个组分分离并对各个组分的分布进行了定量分析.用该方法对美国药典标准品(USP)、商品和实验室制备的低分子量硫酸化多糖糖链数分布进行了定量化比较,证明该方法可用于低分子量硫酸化多糖类药物的组成成分的质量控制.
关键词:
体积排阻色谱
,
低分子量硫酸化多糖
,
组成分布
,
质量控制
张倩倩
,
张雪佩
,
张含智
,
康经武
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2013.04032
发展了一种基于毛细管电泳(CE)-激光诱导荧光(LIF)检测的多个细胞内源激酶的抑制剂平行筛选及选择性评价方法.CE高效的分离能力和LIF检测器的高选择性,使得同时测试多个胞内激酶的活性成为可能.共4种细胞系、3种特异性蛋白激酶底物肽、2种选择性蛋白激酶抑制剂和1种非选择性蛋白激酶抑制剂用于方法的建立.特异性底物肽与细胞裂解液混合后孵育,被其相应的激酶选择性地磷酸化,利用CE-LIF分离检测磷酸化产物和底物肽.同时测定一个抑制剂对几种蛋白激酶的抑制活性,用于评价抑制剂的选择性.与传统的单靶标筛选模式相比,这种基于细胞裂解液的多靶标筛选方法能提供更多的信息,更加高效,且细胞裂解液作为一种廉价的激酶来源大大降低了筛选成本.
关键词:
毛细管电泳
,
激光诱导荧光检测
,
蛋白激酶抑制剂筛选
,
选择性评价
张倩倩
,
康经武
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2013.04029
发展了一种基于体积排阻色谱测定低分子量肝素(LMWH)抗凝血活性的方法.利用肝素与抗凝血酶Ⅲ(ATⅢ)结合后可增强ATⅢ对凝血因子Xa (FXa)抑制作用的原理,通过测定加入LMWH后FXa水解其生色底物产生对硝基苯胺(pNA)这一反应的抑制程度确定LMWH的活性.首先将含有一定浓度LMWH的缓冲溶液与ATⅢ溶液混合,然后依次加入FXa和生色底物,分别孵育一段时间.底物被FXa水解,产生游离的pNA.体积排阻色谱可将小分子产物pNA与其他大分子分离开,因而可以在pNA的最大吸收波长下得到高灵敏度的测定,并且不再受其他成分的干扰.该方法重复性好,灵敏度高,极大地减少了样品的消耗量,降低了成本,并且还可进行各种复杂样品(如血浆)中LMWH抗FXa活性的监测.
关键词:
体积排阻色谱
,
抗凝血因子Xa
,
低分子量肝素
张艳梅
,
康经武
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2013.03013
发展了毛细管电泳(CE)和高效液相色谱-质谱(HPLC-MS)相结合的用于天然产物中活性成分筛选和鉴定的方法.该方法中,用HPLC半制备柱对天然产物粗提物进行分离纯化,再用CE对HPLC纯化后的组分进行活性测试.根据HPLC-MS/MS提供的二级质谱数据,即可确定活性成分的化学结构.以乙酰胆碱酯酶为实验模型,对我们发展的筛选方法进行了验证.从黄连粗提物中确定了药根碱、巴马汀等7种活性成分,并通过CE测定了它们的半抑制率(IC50)值.与传统的天然产物分离纯化和活性筛选方法相比,该方法具有简单、微量、快速、准确的优点.本文建立的方法为天然产物粗提物中活性成分的筛选提供了新技术.
关键词:
毛细管电泳
,
高效液相色谱-质谱
,
活性成分
,
天然产物
,
药物筛选
李凤
,
康经武
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2013.12018
发展了一种新型的磁性纳米粒子应用于人血清中特异性糖蛋白的亲和富集。制备的磁性纳米粒子具有核/壳/壳结构，即由 Fe3 O4磁性粒子/硅胶层/有机聚合物外层构成。伴刀豆凝集素 A（Con A）以共价键合的形式通过短链聚乙二醇固定在粒子表面，实现了人血清中特异性糖蛋白的高效富集。富集的蛋白经过胰蛋白酶酶解后，所得的肽段经离线的二维色谱分离，用高分辨质谱共鉴定出80种蛋白。通过 NetNGlyc 等搜索软件分析确定其中76种为糖蛋白，分析发现在血清中质量浓度仅为0.00001 g / L 的β-2-glycoprotein 1也得到了鉴定，表明我们发展的磁性纳米粒子与凝集素相结合的方式，可以高效地富集复杂体系中与主要蛋白成分含量相差12个数量级的低丰度糖蛋白。
关键词:
液相色谱
,
质谱
,
富集
,
糖蛋白
,
凝集素
,
磁性纳米粒子
徐峰
,
万晓龙
,
王军锋
,
康经武
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2015.10002
建立了4个单手性和3个双手性（含有手性中心和面手性）的二茂铁衍生物在 Chiralpak IC（纤维素-三（3，5-二氯苯基氨基甲酸酯））和 Chiralpak IE3（直链淀粉-三（3，5-二氯苯基氨基甲酸酯））手性固定相上的高效液相色谱分离方法。4个单手性二茂铁衍生物中有3个可以在 Chiralpak IE3固定相上实现基线分离，另外1个则在Chiralpak IC手性固定相上实现基线分离。3个双手性二茂铁衍生物可在 Chiralpak IC 手性固定相上实现基线分离。研究表明，这两种手性固定相对二茂铁衍生物具有较好的手性识别作用，并且具有互补作用。这一研究结果可为手性二茂铁化合物的分离提供借鉴和参考。
关键词:
高效液相色谱
,
纤维素-三( 3,5-二氯苯基氨基甲酸酯)
,
直链淀粉-三( 3,5-二氯苯基氨基甲酸酯)
,
手性固定相
,
二茂铁衍生物
,
手性分离
张明瑜
,
康经武
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2016.08034
在生产和贮存低分子量肝素的过程中，糖链上的硫酸酯基团会被水解而损失活性，因此肝素样品中常可以检测到游离的硫酸根离子，此外在生产过程中还会引入其他阴离子。为了检测低分子量肝素的质量稳定性，常用离子色谱检测低分子量肝素中游离的阴离子。但是相对分子质量较大的低分子量肝素会污染离子色谱柱和抑制器。为此发展了一种灵敏的毛细管电泳方法用于测定低分子量肝素中游离的SO2－4、Cl－、F－、PO3－4和OAc－。不同于常用的背景吸收离子铬酸根，采用邻苯二甲酸根作为背景吸收电解质。与铬酸根相比，邻苯二甲酸根与所有待测阴离子电泳淌度匹配得更好，因此可以获得较窄的峰形。而且邻苯二甲酸根在230 nm检测波长下的摩尔吸光系数（4754 L／（mol·cm））比铬酸根（254 nm，2400 L／（mol·cm））高。因此，可以将毛细管电泳检测阴离子的灵敏度提高到与离子色谱法相当的水平。通过验证，该方法在0?002～1 mmol／L的浓度范围内具有较好的线性关系，日内（ n＝6）和日间（ n＝3）迁移时间和峰面积的相对标准偏差均小于3％。所测阴离子的检出限（ S／N＝3）和定量限（ S／N＝10）分别为0?4～0?8μmol／L和2～4μmol／L。该方法可用于监测低分子量肝素的稳定性。
关键词:
毛细管电泳
,
阴离子分析
,
低分子量肝素
,
稳定性监测
