韩彬
,
王平利
,
张丽华
,
屈锋
,
梁振
,
邓玉林
,
张玉奎
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2009.04.001
芯片自由流电泳对于来源稀少的重要生物样品的连续预分级和微制备具有重要的意义.本文在自由流芯片的微分离腔内,通过原位光引发聚合反应制备了聚丙烯酰胺整体材料,并进行了pH梯度的固定化,从而构建了基于固定化pH梯度整体(M-IPG)材料的芯片自由流等电聚焦模式(μFF-IEF).利用该新型分离模式,实现了异硫氰酸荧光素(FITC)标记的最小等电点相差0.33的甘氨酸、脯氨酸和赖氨酸混合物的分离,且分离结果优于传统的μFF-IEF.实验结果表明,通过发展基于M-IPG材料的μFF-IEF模式,不仅可以避免在缓冲溶液中添加两性电解质对后续采用其他模式分离和质谱鉴定的干扰,而且可以获得较高的分离和富集能力,有望在微量样品的连续分离和制备方面发挥重要作用.
关键词:
芯片自由流电泳
,
等电聚焦
,
固定化pH梯度
,
整体材料
,
氨基酸
于琦
,
牛荻涛
,
元成方
,
屈锋
硅酸盐通报
本文分析了冻融环境下混凝土碳化影响因素,通过对试验数据进行回归分析,得到了冻融-碳化损伤系数的数学表达式,在此基础上建立了以冻融循环次数、水胶比等为主要参数的混凝土碳化深度预测模型.经实验验证,模型计算值与工程检测结果吻合较好.此模型的提出为科学预测冻融环境下钢筋开始锈蚀时间奠定了基础.
关键词:
冻融环境
,
混凝土碳化
,
预测模型
屈锋
,
林金明
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2001.06.003
建立了同时测定氧化型和还原型辅酶Q以及维生素E的液相色谱-电化学检测方法.样品中氧化型和还原型辅酶Q9和Q10以及维生素E混合物经过液相色谱分离柱分离,在-550 mV的电化学调节池中将氧化型辅酶Q还原为还原型, 再经过150 mV分析池将样品中原有的还原型辅酶Q和经过调节池还原的辅酶Q以及维生素E一同氧化.该方法用于小鼠组织线粒体和血浆样品中氧化型和还原型辅酶Q9和Q10以及维生素E的同时检测,灵敏度高,选择性好,结果令人满意.
关键词:
液相色谱
,
电化学检测
,
辅酶Q
,
维生素E
,
血浆
,
线粒体
宋冠群
,
董文举
,
林金明
,
屈锋
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2003.04.013
用胶束电动色谱法建立了茶叶的色谱指纹谱并用于分析10种中国名茶.这种色谱指纹谱是由相对保留值(α)和相应的相对峰面积(Sr)组成的.该方法将色谱图转换成数据表,实现了图谱的数据化;并且以相对保留值表示各色谱峰的峰位,大大减少了各种操作条件对色谱相对保留值的影响,降低了色谱峰峰位变化的波动性,提高了样品间的可比性.这种色谱指纹谱在没有标准品的情况下也可得出可靠的、有意义的结果.优化后的色谱条件是:电泳电解质为硼砂0.02 mol/L、十二烷基硫酸钠(SDS)浓度为0.025 mol/L的溶液(pH 7.0),分析电压20 kV,紫外检测波长280 nm,1.5 kPa压力条件下进样10 s,熔融石英毛细管内径为50 μm、总长60 cm、有效长度45 cm.该方法不需要标样,操作简单、花费低,可为茶叶的质量评估提供科学依据.
关键词:
胶束电动色谱
,
指纹图谱
,
茶叶
,
质量评估
屈锋
,
韩彬
,
邓玉林
,
张丽华
,
张玉奎
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2008.03.002
对自由流电泳的分离原理、分离模式、影响分离的因素和条件以及自由流电泳仪器的发展进行了介绍,对近年来自由流电泳在离子、小分子和微粒分离,多肽和蛋白质分离,细胞和细胞器分离,药物对映体分离,微芯片装置以及蛋白质组学等方面应用研究的进展进行了综述.引用文献73篇.
关键词:
自由流电泳
,
应用
,
进展
厉红
,
屈锋
,
徐建栋
,
邓玉林
色谱
建立了一种用毛细管电泳法检测牛血清白蛋白(BSA)与脂质体相互作用的分析方法.氧化指数的测定实验结果表明经过冷冻干燥的脂质体稳定性更好;毛细管电泳表征脂质体的电荷性质实验结果表明脂质体在pH 5.0～8.0的条件下呈电中性.在pH 7.0的条件下,以各种浓度的脂质体混悬液为电泳缓冲液,以0.8%二甲亚砜(DMSO)为内标,随着缓冲液中脂质体质量浓度从0增加到2.4 mg/mL,BSA的有效淌度从-2.232×10-4 cm2·V－1·s－1变化到-3.046×10-4 cm2·V－1·s－1;结合Scatchard分析,测得BSA与脂质体的结合常数为2.522×103(g/mL)－1.该方法简单、快速,为研究蛋白质与脂质体的相互作用提供了新的技术手段.
关键词:
毛细管电泳
,
牛血清白蛋白
,
脂质体
高培峰
,
赵新颖
,
贺木易
,
刘庆生
,
屈锋
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2013.03059
利用一步法和两步法毛细管等电聚焦(clEF)方法分离测定了蛋白质和多肽的等电点(pI).讨论了两步法等电聚焦过程所需的溶液组成、样品进样体积、聚焦电压、聚焦时间和分离条件等因素对分离效果的影响.并对一步法和两步法进行了比较.对细胞色素C、血红蛋白、肌红蛋白、转铁蛋白和牛血清白蛋白以及6种多肽的分析结果表明:一步法步骤简单,分离速度快,可测定单一组分的pI,也能快速分离混合蛋白和多肽,但分离度较差,且不能同时准确测定各组分的pI;两步法步骤复杂,分析时间较长,但能够同时分离并准确测定混合样品中各组分的pI,所测的pI值与单一组分进行测定的结果基本一致.两种方法可相互结合、互为补充,可广泛应用于两性生物微粒等电点的快速和准确测定.
关键词:
毛细管等电聚焦
,
一步法
,
两步法
,
蛋白质
,
多肽
汪勇
,
高培峰
,
赵新颖
,
屈锋
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2013.03052
建立了毛细管电泳表征多肽和糖蛋白稳定性的方法.分别以血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)和植物血球凝集素(PHA)、牛凝血酶(B-Thr)、人凝血酶(H-Thr)、辣根过氧化物酶(HRP)4种糖蛋白为多肽和糖蛋白的模式分子.从样品浓度、电泳缓冲液、样品溶液pH和离子强度等方面优化了血管紧张素Ⅱ的分离分析条件;从毛细管的选择、样品的电荷状态、电泳缓冲液的选择和分离电压的影响等方面讨论了糖蛋白的分离条件.Ang Ⅱ和4种糖蛋白的稳定性试验结果表明:Ang Ⅱ可在pH 7.4的硼酸盐缓冲液(0.02 mol/L)中于4℃下稳定放置48 h;4种糖蛋白可在pH 7.4硼酸盐缓冲液(0.2 mol/L)中于20,4,-20℃下稳定放置48 h;放置时间大于一周且小于四周时,在-20℃下各蛋白质均保持稳定;放置时间大于两周且小于四周时,只有HRP在上述3个温度下均保持稳定.该方法具有高效、快速、简单、低成本的特点,可广泛应用于多肽和蛋白质的稳定性表征.
关键词:
毛细管电泳
,
多肽
,
糖蛋白
,
稳定性
