唐君
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郭凯珠
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陈文东
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宋培培
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封顺
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胡巢凤
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许瑞莲
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田瑞军
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2016.09033
建立了基于Fe3O4/乙二胺四乙酸(EDTA)磁性粒子的集成化蛋白质组学研究方法.首先用共沉淀法合成EDTA负载的Fe3O4/EDTA磁性粒子.在优化的溶液条件下(95％乙腈-1％三氟乙酸,体积分数),100 μg Fe3O4/EDTA磁性粒子可吸附12.4μg牛血清白蛋白(BSA),吸附容量是商品化磁珠的10倍左右.以BSA作为标准蛋白质,对所合成的Fe3O4/EDTA磁性粒子作为蛋白质组学反应器的酶解时间进行了优化,发现Fe3O4/EDTA磁性粒子处理BSA酶解1、8和16h的肽段序列覆盖率和特征肽段结果相当.因此,可以将复杂的蛋白质样品前处理时间缩短至2h内.最后,将所合成的Fe3O4/EDTA磁性粒子应用于血清的蛋白质组学研究,成功地鉴定出218种蛋白质,其中包含了41种美国食品药品管理局(FDA)认证的生物标志物.所发展的基于Fe3O4/EDTA磁性粒子的蛋白质组学样品前处理方法将蛋白质样品预富集、还原、烷基化、酶解、多肽除盐和洗脱等步骤集成到一起,减少了样品转移和处理所造成的损失.这种技术具有快速、灵敏和易于操作的特点,可用于临床蛋白质组学研究.
关键词:
Fe3O4/乙二胺四乙酸(Fe3O4/EDTA)
,
磁性粒子
,
蛋白质组学
,
样品前处理
马玉花
,
黄冬群
,
张瑞
,
徐世茹
,
封顺
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2013.07033
建立了高效液相色谱(HPLC)同时测定尿液中4种常见的非蛋白氮物质——肌酸(Cr)、尿肌酐(Cn)、尿酸(Ua)及假尿嘧啶核苷(Pu)含量的方法.尿液首先经丙酮沉淀法除去大分子化合物,然后冷冻干燥,复溶后直接进行HPLC分析.色谱分离选用Waters RP18 Column(150 mm×4.60 mm,3.5 μm),以10.0 mmol/L磷酸缓冲溶液(pH 4.78)和乙腈为流动相进行梯度洗脱,流速为0.8 mL/min,于220 nm波长下检测,可在7 min内完成4种非蛋白氮的快速分离分析.结果表明Cr、Cn、Ua、Pu在0.1～250 mg/L范围内线性关系均良好(相关系数均大于0.999),检出限分别为9.31、26.19、4.70、6.30 μg/L,加标回收率为81％ ～ 111％,峰高的相对标准偏差(RSD,n=3)为0.23％～ 2.78％,满足定量要求.该法简便、快速,结果准确可靠,为2型糖尿病(T2DM)患者肾功能损坏的研究提供了检测手段.
关键词:
高效液相色谱法
,
肌酸
,
尿肌酐
,
尿酸
,
假尿嘧啶核苷
,
尿液
张旭龙
,
刘银
,
巩治国
,
王鹏举
,
王吉德
,
封顺
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2014.05038
建立了同时测定聚合物食品包装材料中8种常用添加剂 Irgafos 168、Irganox 1010、Irganox 1076、丁基羟基茴香醚（BHA）、没食子酸丙酯（PG）、没食子酸十二酯（ DG）、叔丁基对苯二酚（ TBHQ）和苯三唑甲酚（ UV-326）的超高效液相色谱-串联质谱方法。试样以二氯甲烷为溶剂进行超声提取；采用 Waters BEH-C18柱（50 mm ×2.1 mm，1.7μm）分离，以0.05％甲酸水溶液和甲醇为流动相进行梯度洗脱；采用电喷雾离子源正、负离子切换模式和多反应监测模式进行检测。8种添加剂在相应的质量浓度范围内定量离子的峰面积与质量浓度均呈良好线性关系（相关系数 R2均大于0.993），回收率为63.9％~127.0％，相对标准偏差（RSD，n =6）≤15.8％，检出限（ S / N =3）为0.13~5.50μg / L，定量限（S / N =10）为0.45~17.50μg / L。该方法简便快捷、灵敏度高，适合食品包装材料中常用添加剂的分析测定。
关键词:
超高效液相色谱-串联质谱
,
添加剂
,
食品包装材料
,
聚合物
李静
,
郭展辰
,
赵旭
,
马玉花
,
韩萍
,
封顺
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2015.07022
建立了一种高效液相色谱同时测定尿液中4种肾脏病常用药物依那普利、氨苯蝶啶、呋塞米及缬沙坦含量的方法。色谱分离选用 WondaSil C18-WR（150 mm×4.6 mm，5μm）；以10.0 mmol／L乙酸铵溶液（pH 3.90）和乙腈为流动相进行梯度洗脱，流速为1.0 mL／min，于254 nm波长下检测，18 min内实现了4种药物的分离分析。结果表明依那普利、氨苯蝶啶、呋塞米、缬沙坦分别在0.15~300 mg／L、0.05~100 mg／L、0.75~750 mg／L、0.05~100 mg／L范围内线性良好，检出限依次为1.38×10-2、7.67×10-3、3.69×10-2、1.16×10-2 mg／L，平均加标回收率在89.49％~99.20％之间，相对标准偏差（ RSD，n=3）在4.12％~9.44％之间。结果表明该方法样品处理简便、快速，结果准确可靠，为肾脏病患者尿液中的治疗药物浓度监测提供了一种新方法。
关键词:
高效液相色谱法
,
依那普利
,
氨苯蝶啶
,
呋塞米
,
缬沙坦
,
尿液
,
肾脏病
