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一种基于二喹啉甲酸-Cu+显色反应的毛细管电泳检测蛋白质的新方法

孟庆威 , 郭磊 , 申睿 , 谢剑炜

色谱 doi:10.3724/SP.J.1123.2010.00682

采用毛细管电泳法和蛋白质显色反应-二喹啉甲酸(BCA)法,结合微波辅助反应,在60 mmol/L 硼酸盐缓冲液(pH 9.5)中,实现了对蛋白质的快速毛细管电泳分析检测.同时以β-环糊精为包合添加剂,实现了BCA-Cu+复合物和游离BCA的分离,从而在波长200 nm处以测定特征生成的BCA-Cu+复合物来间接检测蛋白质,其峰强度比直接检测蛋白质自身吸收的峰强度提高了2个数量级.对于转铁蛋白、蓖麻毒素,其线性范围分别为2~200 mg/L 和2~100 mg/L,检出限分别为0.33和0.37 mg/L.将该方法成功地应用于第一届蓖麻毒素国际实验室间比对测试的部分样品,含量测定结果满意.

关键词: 毛细管电泳 , 二喹啉甲酸 , 亚铜离子 , 显色反应 , β-环糊精 , 蛋白质

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