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羟基磷灰石纳米颗粒诱导巨噬细胞凋亡及其与HSP70相互关系的研究

徐东菁 , 张稷 , 丁婷婷 , 孙皎

功能材料

研究羟基磷灰石纳米颗粒(HAp nanoparticles)引起巨噬细胞凋亡,及其与热休克蛋白Hsp70的相关性.THP-1单核细胞株经PMA诱导成为巨噬细胞,分别加入0、20、100μg/ml HAp纳米颗粒,培养24h后经PI和AnexinV染色,在荧光显微镜下观察,用流式细胞仪检测细胞的凋亡情况,应用western blot 方法检测Hsp70蛋白分子表达的改变.显微镜观察显示THP-1单核细胞株能被诱导成巨噬细胞.荧光显微镜显示20、100μg/ml HAp纳米颗粒组凋亡的阳性信号明显强于0μg/ml对照组;流式细胞仪检测结果也证实HAp纳米颗粒组比对照组凋亡率明显增高(P1<0.0001,P2<0.0001),且凋亡的程度呈浓度依赖性(P3=0.025).Western Blot 检测显示20、100μg/ml HAp纳米颗粒组较对照组Hsp70蛋白表达增加,并且随颗粒浓度增高而表达增加.

关键词: 羟基磷灰石 , 纳米颗粒 , 凋亡 , 热敏蛋白70

聚氨酯和聚四氟乙烯诱导内皮细胞炎性活化的免疫学机制

薛旸 , 吴婕 , 孙皎

功能材料

聚氨酯(PU)和聚四氟乙烯(PTFE)是两种常用的血液接触生物材料.该研究通过建立一个非接触的细胞共培养模型从而针对材料刺激血液单核细胞活化后诱导血栓的潜能进行评估.运用人脐静脉内皮细胞和人单核细胞系THP-1进行实验,首先将PU和PTFE与THP-1细胞直接接触,然后收集细胞上清液,用上清液培养人脐静脉内皮细胞,结果发现内皮细胞上调炎症趋化因子单核细胞趋化蛋白1(MCP-1),巨噬细胞炎症蛋白-1α(MIP-1α)的表达.为进一步探讨THP-1细胞在其中所起到的作用,用MTS试验研究细胞的增殖程度,用ELISA试验研究细胞所分泌的可溶性分子,结果发现这些材料能不同程度地刺激THP-1细胞增殖及活化,使其分泌细胞因子TNF-α及/或IL-1β.研究表明,与血液接触的生物材料可能通过作用于单核细胞,使其增殖及活化,分泌促炎症因子,使得内皮细胞发生炎性激活,最终导致血栓形成.

关键词: 生物材料 , 人脐静脉内皮细胞 , 单核细胞 , 增殖 , 炎症

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