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柱前衍生高效液相色谱-荧光检测法测定血浆中同型半胱氨酸

唐秀芳 , 甄乾娜 , 樊子勉 , 冯成亚 , 丁敏

色谱 doi:10.3724/SP.J.1123.2012.03026

建立了一种柱前衍生高效液相色谱-荧光检测法用于测定血浆中同型半胱氨酸(Hcy).使用三(2-羧乙基)膦盐酸盐(TCEP)为还原剂,N-(1-芘)马来酰亚胺(NPM)为衍生剂进行样品预处理,Agilent Hypersil C-18柱(250mm ×4.0 mm,5μm)进行分离,流动相为15 mmol/L醋酸钠-乙腈-混合酸(300 mL水中含1mL醋酸和1mL磷酸)混合溶液,采用梯度洗脱,荧光检测激发波长为330nm,发射波长为380 nm.Hcy的回收率为(102.08±4.94)%.线性范围为0.500~100μmol/L,检出限(以信噪比为3计)为0.016μmol/L.日内与日间相对标准偏差均小于5%.利用该方法对7例高血压患者和7例健康志愿者的血浆进行了测定,结果表明两组间的Hcy含量存在显著的差异(p<0.05).本方法简单、快速、灵敏、特异,适用于血浆Hcy的临床定量测定.

关键词: 高效液相色谱 , 荧光检测 , 同型半胱氨酸 , 血浆

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