曹冬
,
周春喜
,
张养军
,
韩春光
,
邓玉林
,
钱小红
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2009.02.006
通过在肽段的N端引入磺酸基,从而使含组氨酸的肽段与其他肽段在pH<3.0的条件下产生电荷差异,建立了一种基于强阳离子交换色谱(SCX)结合生物质谱富集鉴定含组氨酸肽段的方法,并以含有组氨酸的标准蛋白质为模型,进行了方法学考察.结果表明,经N端磺酸化后,含组氨酸的肽段能有效地被阳离子交换色谱富集,且在肽的N端引入磺酸基促进了肽的裂解,使之产生简单而信息丰富的二级质谱图,从而得到完美的质谱鉴定结果.这说明磺化修饰结合强阳离子交换色谱用于含组氨酸肽段的富集鉴定是可行的,且具有在蛋白质组研究中应用的潜力.
关键词:
强阳离子交换色谱
,
基质辅助激光解吸电离飞行时间串联质谱
,
磺化修饰
,
富集
,
鉴定
,
组氨酸标签肽
周春喜
,
廖杰
,
黎力
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2002.03.011
以十二烷基硫酸钠(SDS)胶束为准固定相,考察了咖啡因及其9种类似物在胶束电动毛细管色谱(MECC)分离模式下的分离行为.研究了运行缓冲液的pH值、磷酸盐浓度、SDS浓度、甲醇体积分数、分离电压、分离温度等因素对这10种化合物的迁移时间和分离效果的影响.结果发现,这些因素对上述10种化合物的分离有显著的影响,尤以pH值为最.它不仅影响化合物的迁移时间和分离效率,还改变其出峰顺序,这与碱性条件下化合物仲胺基上氢的电离有关.优化后的分离条件:运行缓冲液为20 mmol/L磷酸盐-20 mmol/L SDS(pH 11.0),分离电压为25 kV,分离温度为25 ℃.方法的检出限为0.70 mg/L,线性范围为1.40 mg/L～45.5 mg/L.
关键词:
毛细管电泳
,
胶束电动毛细管色谱
,
咖啡因
,
类似物
