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盐酸丙咪嗪-人血清白蛋白结合作用的毛细管区带电泳测定法

周大炜 , 李发美

色谱 doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2003.02.011

采用毛细管区带电泳(CZE)技术,研究了抗抑郁三环类碱性药物盐酸丙咪嗪与人血清白蛋白(HSA)的结合作用.通过经典方法(超滤法)对该方法进行了方法学确证.该法适宜于水溶性良好的碱性药物(迁移时间足够短,且与蛋白质形成的复合物较稳定)-蛋白系统中分子间相互作用的定量考察.应用SAS 统计软件中非线性回归分析平台自编程序,求得了丙咪嗪与HSA的结合常数和结合位点数:K=0.18 L/μmol;n=2.2. 实验证明:该法可靠、简单、高效、低耗.

关键词: 毛细管区带电泳 , 人血清白蛋白 , 丙咪嗪 , 结合参数

酮洛芬与蛋白结合作用的高效液相色谱-迎头分析法研究及其与高效毛细管电泳-迎头分析法的比较

周大炜 , 李发美

色谱 doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2004.06.007

采用高效液相色谱-迎头分析法(HPLC-FA),以67 mmol/L (pH 7.4, I=0.17 mol/L) 的等渗磷酸盐缓冲液为流动相,Pinkerton GFF Ⅱ-S5-80内表面反相柱(150 mm×4.6 mm i.d., 5 μm)为固定相,254 nm下检测,研究了酮洛芬与人血清白蛋白(HSA)的结合作用,通过非线性回归参数估算求得酮洛芬与HSA的结合参数.与高效毛细管电泳-迎头分析法(HPCE-FA)相比,HPLC-FA法具有高灵敏度的优势,但进样量较大,分析时间较长.HPLC-FA法的测定结果表明,HSA分子上酮洛芬的两类结合位点(第一类和第二类)共存.当酮洛芬与HSA的量比较低时,酮洛芬主要结合在第一类位点;当它们的量比较高时,结合才发生在第二类结合位点.

关键词: 高效毛细管电泳-迎头分析 , 高效液相色谱-迎头分析 , 人血清白蛋白 , 蛋白结合作用 , 酮洛芬

高效液相色谱法研究与蛋白结合中的药物相互作用

李发美 , 郭兴杰 , 乔明曦 , 熊志立 , 周大炜

色谱 doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2004.04.014

关键词:

药物-蛋白结合作用的分析方法研究

周大炜 , 李乐道 , 李发美

色谱 doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2004.02.005

综述了定性和定量研究药物-蛋白结合作用的部分方法,包括色谱、毛细管电泳、核磁共振光谱、质谱等方法及一些传统方法如平衡透析、超滤等方法,并讨论了各自的优点和局限性.

关键词: 药物-蛋白结合 , 结合参数 , 综述

药物间置换相互作用的毛细管电泳-迎头分析法研究

周大炜 , 王怀锋 , 李发美

色谱 doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2005.02.016

将18-甲基炔诺酮加到人血清白蛋白-酮洛芬平衡溶液中,室温孵育达平衡后应用毛细管电泳-迎头分析法研究了18-甲基炔诺酮和酮洛芬在人血清白蛋白分子上的置换相互作用.一大体积样品虹吸进样至未涂层毛细管(65 cm×50 μm i.d.,有效长度35 cm),进样时间80 s,毛细管两端高度差11 cm,工作电压10 kV,运行缓冲液为67 mmol/L磷酸盐缓冲液(pH 7.4),游离酮洛芬浓度由前沿峰的高度直接测定.当酮洛芬样品溶液中酮洛芬的总浓度分别为100 μmol/L和200 μmol/L时,随着18-甲基炔诺酮加入量的增加(18-甲基炔诺酮的浓度由0增至200 μmol/L),游离酮洛芬的浓度分别从22.4 增至26.4 μmol/L和从82.1增至106.2 μmol/L.由上面的结果可推论:高浓度的18-甲基炔诺酮可将酮洛芬从它的第二类结合位点上置换出来.

关键词: 毛细管电泳-迎头分析 , 人血清白蛋白 , 置换相互作用