赵良娟
,
邹娟娟
,
王秀丽
,
阎超
,
高如瑜
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刘明羽
,
吕宪禹
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2005.06.022
以1.5 μm无孔硅胶颗粒(non-porous silica,NPS)为固定相,采用电压和压力联合驱动流动相,用反相梯度加压毛细管电色谱(p-CEC)在7.5 min内实现了核糖核酸酶A、细胞色素C、溶菌酶和肌红蛋白等4种蛋白质的快速、高效的分离.比较了梯度加压毛细管电色谱和微柱液相色谱(μ-HPLC)分离蛋白质的结果,同时考察了固定相、离子对试剂三氟醋酸(TFA)浓度和电压等条件对梯度加压毛细管电色谱分离蛋白质的影响.结果表明,梯度p-CEC可以通过调节电压精细调节带电溶质的保留,提高分离选择性,缩短分离时间,得到较高的柱效.该方法在蛋白质分离分析及蛋白质组学的研究中具有很大的应用潜力,为高效快速地分离蛋白质开辟了新的途径.
关键词:
梯度洗脱
,
加压毛细管电色谱
,
反相色谱
,
蛋白质
孙慧
,
董襄朝
,
吕宪禹
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王海波
,
韩建仿
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2003.03.011
以氧氟沙星作为模板分子合成了分子印迹聚合物,并通过高效液相色谱法研究了印迹聚合物的识别特性.实验结果表明,印迹聚合物对模板分子具有很强的亲和力和特定的选择性.作为色谱固定相,氧氟沙星印迹聚合物和目标分子之间的相互作用除了印迹部分的离子和氢键作用外,也存在非印迹部分的疏水作用.同时研究了色谱条件对氟喹诺酮类药物分离的影响.
关键词:
高效液相色谱法
,
分子印迹聚合物
,
氧氟沙星
,
固定相
,
氟喹诺酮类药物
朱晔荣
,
吕宪禹
,
王秀玲
,
王勇
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2003.06.012
报道了一种用反相高效液相色谱法(HPLC)测定丝氨酸:乙醛酸转氨酶(SGAT,EC2.6.1.45)活性变化的有效方法.将酶初提液与含有L-丝氨酸和乙醛酸的反应体系在30 ℃下反应1 h,反应终止后进行2,4-二硝基氟苯衍生化,通过HPLC测定酶反应前后甘氨酸的衍生化产物量的变化来分析酶的活性.通过流动相组成和浓度梯度的优化,既节省了流动相的用量,也避免了气泡的产生.研究结果表明,该测定方法的准确度和灵敏度比分光光度法和纸色谱分析法高,且简便易行;对于其他转氨酶活性的测定也有一定的参考价值.
关键词:
反相高效液相色谱法
,
丝氨酸:乙醛酸转氨酶
,
活性测定
