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反相高效液相色谱中流动相线性梯度洗脱条件下溶质保留时间预测的新方法

单亦初 , 赵瑞环 , 张维冰 , 张玉奎

色谱 doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2001.03.020

在计算溶质的梯度保留时间时,根据流动相在色谱柱内的分布规律,对溶质在色谱柱内的迁移距离和流动相梯度同时进行校正,从而建立了一种预测溶质线性梯度洗脱条件下保留时间的新方法.该方法在不同的仪器系统中,对于弱保留和强保留溶质在不同线性梯度洗脱条件下保留时间的预测,都具有良好的准确度.以15种氨基酸和8种苯的同系物为例,该方法对于弱保留溶质保留时间的预测,相对平均误差分别为3.70%和4.90%,远小于文献方法得到的结果(23.61%和31.16%);对于强保留溶质保留时间的预测,相对平均误差分别为0.21%和6.01%,略小于文献方法得到的结果(0.81%和6.69%).

关键词: 高效液相色谱法 , 线性梯度 , 保留时间 , 预测

可调移动重叠分离图法用于高效液相色谱多台阶梯度分离条件优化的研究

单亦初 , 张维冰 , SEIDEL-MORGENSTERN Andreas , 赵瑞环 , 张玉奎

色谱 doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2006.02.004

计算机辅助高效液相色谱(HPLC)分离条件优化可以低成本、快速地得到优化的分离条,因而已较为广泛地用于复杂样品的分离分析.基于移动重叠分离图方法,又发展了一种新型的多台阶梯度分离条件的优化方法可调移动重叠分离图法.该方法通过预测不同流动相条件下各组分的保留时间、峰宽和分离度,绘制出对于样品中各组分的重叠分离区域图.在对当前台阶流动相组成进行优化的同时,考虑其对后面一到两个台阶上流出组分保留的影响,实时地重新绘制对于后面台阶上流出组分的重叠分离区域图.通过观察当前台阶流动相条件对当前台阶和后面台阶上流出组分分离的影响,综合考虑样品中所有组分的分离情况,找到更接近全局最优的分离条件.通过扫描的方法对优化得到的分离条件进行微调,能够进一步提高分离效果.采用文献数据对可调移动重叠分离图法的应用加以说明,在二元流动相体系下,证明了该方法在HPLC方法建立方面的优越性.

关键词: 高效液相色谱 , 分离条件优化 , 可调移动重叠分离图

芯片自由流电泳的研究进展

王平利 , 梁振 , 张丽华 , 单亦初 , 张玉奎

色谱 doi:10.3724/SP.J.1123.2011.00303

芯片自由流电泳(μ-FFE)是一种连续微制备或预分离技术,已在细胞、细胞器、蛋白质等生物样品的分析中发挥了重要作用.本文系统综述了μ-FFE的研究进展,侧重于介绍各种自由流芯片的结构、分离模式和应用.此外,还对μ-FFE的发展方向进行了展望.

关键词: 自由流电泳 , 芯片 , 综述

基于稳定同位素标记的蛋白质组学定量方法研究进展

周愿 , 单亦初 , 张丽华 , 张玉奎

色谱 doi:10.3724/SP.J.1123.2013.05007

定量蛋白质组学已经成为后基因时代的重要研究方向之一.目前该领域的研究主要采用无标记定量方法和稳定同位素标记定量法.其中,基于稳定同位素标记的蛋白质组定量方法发展非常迅速,已为生命科学研究提供了重要的技术支撑.本文分析了基于稳定同位素标记的蛋白质组学定量方法,包括相对定量方法和绝对定量方法,并对其发展进行了展望.

关键词: 定量蛋白质组学 , 稳定同位素标记 , 相对定量 , 绝对定量

蛋白质组末端肽富集策略研究进展

陈玲凡 , 单亦初 , 张丽华 , 张玉奎

色谱 doi:10.3724/SP.J.1123.2016.10040

蛋白质的末端不仅是蛋白质合成的起点和终点,更参与并调节蛋白质的各项生理功能.研究蛋白质的末端不仅对于蛋白质的结构和功能注释十分必要,还为揭示蛋白酶的作用机理提供重要信息.该文着重针对近年来蛋白质组末端肽富集策略方面取得的进展进行综述,并对蛋白质末端组学技术在蛋白酶作用底物和位点分析中的应用进行了概述.此外,还对蛋白质末端组学研究的发展前景进行了展望.

关键词: 蛋白质末端组学 , 末端肽富集 , 蛋白酶作用底物和位点 , 综述

反相高效液相色谱三元流动相台阶梯度分离条件的快速优化方法

单亦初 , 张玉奎 , 赵瑞环

色谱 doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2002.04.001

根据溶质在色谱柱内的迁移规律,建立了一种利用线性梯度实验快速获得溶质保留值方程系数,然后以串行色谱响应函数为优化指标进行多台阶梯度分离条件优化的方法.与利用等度实验获得保留值方程的方法相比,该法可以大大缩短优化时间.通过该方法对芳香胺和衍生化氨基酸样品进行了分离,获得了满意的分离度,表明该方法的预测精度很好.

关键词: 反相高效液相色谱法 , 线性梯度 , 台阶梯度 , 快速优化

选择性反应监测技术在蛋白质组学研究中的进展及应用

单亦初 , 张丽华 , 张玉奎

色谱 doi:10.3724/SP.J.1123.2013.12019

选择性反应监测(SRM)技术作为一种重要的定向蛋白质分析技术,通过选择性检测特定母离子和子离子来排除非目标组分的干扰,增强了检测灵敏度和定量准确度,具有选择性高、重复性好、灵敏度高、动态范围宽等优点,已被广泛应用于定量蛋白质组学研究,在生命科学领域发挥着至关重要的作用。本文从分析通量、检测灵敏度、定量方法以及相关软件资源4个方面,对近期 SRM 技术的研究进展进行了综述。然后,对 SRM 技术在蛋白质组学研究包括生物标志物验证、蛋白质翻译后修饰研究、生物工程以及信号通路分析等领域中的应用进行了概述。最后,本文对 SRM 技术的应用以及发展前景进行了展望。

关键词: 选择性反应监测 , 蛋白质组 , 定量 , 综述

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