赵睿
,
刘国诠
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2007.02.004
亲和配基的选择与筛选是发展新的亲和色谱填料或构建一个新的亲和色谱体系所必须解决的首要问题.该文结合作者所在实验室的工作,对配基的选择、筛选与应用方面的一些进展进行了简要评述.作者所在实验室针对特定蛋白质和多肽的多肽亲和配基的筛选,开展了反义肽简并性的研究,发展了基于反义肽的组合化学筛选新方法.与常规的组合合成法相比,该方法简单、快捷、有效,极大地减小了合成和筛选的工作量,降低了筛选后亲和组分结构鉴定的难度.所建立的筛选策略已应用于流感病毒、严重急性呼吸道综合征(SARS)病毒亲和抑制剂的筛选和用于人β-干扰素测定的石英晶体微天平(QCM)生物传感器的构建,均取得了有意义的结果.
关键词:
亲和色谱
,
配基
,
筛选
,
应用
刘吉众
,
黄嫣嫣
,
杨博
,
常建华
,
刘国诠
,
赵睿
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2012.12005
以具有双孔结构的聚甲基丙烯酸环氧丙酯(PGMA)微球为基质,以葡萄糖进行表面亲水改性,制备了强阳离子交换色谱填料,并将其用于复杂生命体系中生物大分子的快速而高效的分离、分析与纯化.葡萄糖亲水改性增进了填料的生物相容性,提高了蛋白质样品的回收率；双孔结构及较高的比表面积赋予填料良好的柱渗透性和样品负载量.以标准蛋白质为样品,考察了该填料对生物样品的分离性能.以100mm×4.6 mm的色谱柱分离4种蛋白质,在6 min内实现了基线分离；以溶菌酶为样品,填料的吸附容量为39.5 g/L,在蛋白质快速分离纯化分析中显示了良好的应用前景.
关键词:
强阳离子交换
,
固定相
,
聚甲基丙烯酸环氧丙酯微球
,
葡萄糖改性
,
蛋白质分析
喻昕
,
赵睿
,
刘国诠
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2001.02.015
烷基-二醇基硅胶(ADS)系限进介质的一种，可用于含生物大分子的复杂生物样品的直接进样与分析。一种新的、非常经济的方法可用于烷基-二醇基硅胶的制备。首先，将γ-环氧丙基氧丙基三甲氧基硅烷基键合至微孔硅胶上（粒度5 μm,孔径6 nm）以制备环氧基硅胶，再令环氧基硅胶与硬脂酸在有机溶液中进行反应以制备酯型十八烷基反相填料。将制得的反相填料填充至色谱柱中，并令含有酯酶的溶液通过色谱柱。通过酶解作用可将硅胶表面的酯基除去，而硅胶的内孔表面仍保持疏水特性不变，这是由于硅胶上的小孔对酶分子具有体积排除作用。色谱评价证实了所制备填料的限进色谱行为。
关键词:
液相色谱法
,
限进介质
,
烷基-二醇基硅胶
,
固定相
赵睿
,
李新会
,
刘国诠
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2005.06.009
以碱溶法制备的高孔隙度硅胶为基质,与γ-环氧丙基丙氧基三甲氧基硅烷配基进行共价键合,经过酸性水解,使其转化为二醇基,制成了高效亲水凝胶色谱填料.键合反应中采用70 ℃回流冷凝管,使生成的甲醇可顺利地排到体系外,促使反应向有利于键合的方向进行,以获得较高的配基密度.研究表明,水解反应条件与配基密度以及柱效密切相关.当配基密度为2.6～3.5 μmol/m2时,才能显示出较高的柱效.蛋白质分离实验结果显示,此填料的相对分子质量排阻极限为300 000,牛血清白蛋白的回收率为99%.
关键词:
高效凝胶过滤色谱填料
,
高孔隙度硅胶
,
二醇基
,
蛋白质分离
赵睿
,
李新会
,
刘国诠
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2005.06.008
提出并研究了以碱溶侵蚀提高多孔硅球孔隙度的新方法,研究了碱液浓度、处理温度、反应时间与洗除量的关系.结果表明,随着NaOH浓度的提高,不仅洗除量加大,而且硅胶的溶解速度亦少许增大,其主要原因是由于某些孔结构的塌陷导致了细屑的脱除.温度升高和处理时间延长会导致洗除量增大.随着洗除量的增加,硅胶的比孔容呈线性增大,但其外观仍为均匀的球形,且直径亦未见明显变化.选用粒径4～5 μm、孔径8 nm、比孔容1.4 cm3/g的多孔硅胶,采用1.25 mol/L NaOH水溶液、室温(25 ℃)处理3.0 h,制备了粒径4～5 μm、孔径14 nm、比孔容3.2 cm3/g的高孔隙度多孔硅胶,其孔隙度从75%增加到88%.
关键词:
碱溶法
,
多孔硅胶
,
高孔隙度
