高明霞
,
关霞
,
洪广峰
,
张祥民
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2009.05.005
蛋白质组学出现之后,多维高效液相色谱(multidimensional HPLC,MD-HPLC)系统以其快速、高效、自动化程度高以及容易与质谱等其他技术联用等优势而成为蛋白质组学相关分析技术中研究应用的热点.本文主要以本实验室在蛋白质组学研究中的技术进展为主线,介绍了多维高效液相色谱技术的发展,包括经典的"bottom-up"技术和"top-down"式的多维高效液相色谱技术路线,以及为了提高系统的分离通量而自行设计搭建的阵列式多维高效液相色谱平台,这些技术路线在蛋白质组学研究中有着极大的潜在应用价值.
关键词:
多维液相色谱
,
bottom-up
,
top-down
,
阵列式
,
完整蛋白质
,
蛋白质分离
洪广峰
,
高明霞
,
晏国全
,
关霞
,
陶芊
,
张祥民
色谱
为了构建高效的离子交换/反相二维液相色谱(IEC/RPLC)分离平台系统,提高复杂蛋白质样品的分离效率,对色谱柱进行了评价与筛选.通过对实际人肝蛋白质样品的分离效果的比较,选择确定了TSKgel DEAE-5PW弱阴离子交换色谱柱(WAX)作为第一维色谱分离柱;考察了同一规格的10支代表性反相色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm,30 nm,C4、C8或C18),通过评价其对尿嘧啶、硝基苯、萘和芴的分离性能以及对3种标准蛋白质样品的非特异性吸附、对人肝蛋白质样品的WAX馏分的分离效果,最终确定以Jupiter 300 C4反相色谱柱作为第二维色谱分离柱.对两维色谱柱的选择优化为蛋白质高效分离二维液相色谱平台的搭建提供了可靠基础.
关键词:
蛋白质组学
,
多维液相色谱
,
蛋白质
,
Top-down技术
郑海金
,
关霞
,
李全民
,
刘国光
应用化学
doi:10.3969/j.issn.1000-0518.2005.06.018
研究了以三异辛胺(TIOA)为载体,由壬基酚聚氧乙烯醚(OP-10)、异戊醇、环己烷和NaOH水溶液组成的微乳液分离汞(Ⅱ)的行为及机理. 分别考察了载体三异辛胺、外相盐酸、KBr、内相NaOH在不同浓度时对汞(Ⅱ)萃取率的影响. 当膜相中三异辛胺浓度为0.030 mol/L,内相NaOH的浓度为0.030 mol/L,外相HCl的浓度为0.05 mol/L,KBr为0.10 mol/L时,可使汞(Ⅱ)的萃取率达98%以上. 在该条件下,可使汞(Ⅱ)与Fe(Ⅲ)、Co(Ⅱ)、Ni(Ⅱ)、Zn(Ⅱ)、Mn(Ⅱ)、Cd(Ⅱ)、Pb(Ⅱ)完全分离.
关键词:
微乳液,三异辛胺,分离,汞(Ⅱ)
