王彦
,
高明霞
,
谷雪
,
张祥民
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2005.01.009
搭建了一个纳升级的二维液相色谱分离平台(nano-2D-LC),该平台可以自动完成进样、除盐、分离及鉴定.以离子交换色谱(SCX)为第一维,反相液相色谱(RPLC)为第二维,对鼠肝组织的蛋白质组进行了研究.SCX采用阶梯式洗脱,RPLC运用线性梯度洗脱,以200 nL/min的速度进行分离,峰容量可达620.
关键词:
蛋白质组
,
多维液相色谱
,
鼠肝
,
纳升级
赵震震
,
瞿其曙
,
张欣欣
,
谷雪
,
王彦
,
阎超
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2009.04.010
制备了用于色谱的微米纯金颗粒并键合上十八烷基(C18)官能团;对其进行了扫描电镜、红外光谱、元素分析、氮气吸附分析等表征.测得衍生的金颗粒的粒径、孔径以及比表面积分别为3.5 μm、5.0 nm、49.0 m2/g;红外光谱表明C18官能团已键合在金颗粒表面上;衍生后的金颗粒的含碳量为0.56% .通过电填充法得到长度为36 cm(固定相填充长度为19 cm)、内径为100 μm的毛细管色谱柱.利用极端pH的流动相(80%甲醇,pH 1.0以及pH 12.0)冲洗该色谱柱140 h,比较冲洗前后分析物的保留因子,以考察色谱柱的耐酸耐碱性能.结果表明,冲洗前后分析物的保留因子没有明显的变化,说明该色谱柱有良好的耐酸耐碱性.在毛细管液相色谱模式下,用该柱分离尿嘧啶、苯、萘、2-甲基萘、苊以评价色谱柱的一般性能;在碱性条件下分离咖啡因、茶碱、洛贝林以测定色谱柱分离碱性物质的能力.其分离结果表明,该色谱柱的柱效超过了 50 000 理论塔板/m,且色谱峰形较好.在毛细管加压电色谱模式下,施加+5 kV和-5 kV的电压均可以使苯甲酸和苯胺分离,但电场方向不同时,二者的出峰顺序不同.
关键词:
C18衍生微米金颗粒
,
色谱固定相
,
毛细管液相色谱
,
加压毛细管电色谱
吴漪
,
王彦
,
谷雪
,
张琳
,
阎超
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2010.00226
加压毛细管电色谱(pCEC)具有电泳和液相色谱的双重分离机理,其柱效高、选择性强、分辨率高和分离速度快并可进行梯度洗脱.我们在此基础上加入离子交换色谱模式,构建了强阳离子交换-反相加压毛细管液相色谱(micro strong cation exchange liquid chromatography/reversed phase pressurized capillary electrochromatography,μ-SCXLC/RP-pCEC)二维系统,并对中药黄柏的提取物进行了优化分离.第一维μ-SCXLC采用线性盐梯度分离,样品被切割成11个馏分洗脱收集后进入第二维,第二维脱盐后,采用RP-pCEC进行分离分析,梯度洗脱.以中药黄柏提取物为样品,此二维系统的分辨率和峰容量都较一维系统有很大提高,理论峰容量可达900左右,证明构建的二维体系非常适合复杂样品的分离分析.
关键词:
二维色谱
,
强阳离子交换毛细管液相色谱
,
反相加压毛细管电色谱
,
黄柏
,
中药
李新燕
,
王彦
,
谷雪
,
陈妍
,
阎超
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2010.00231
以甲基丙烯酸丁酯(BMA)和3-[N,N-二甲基-[2-(2-甲基丙-2-烯酰氧基)乙基]铵]丙烷-1-磺酸内盐(SPE)为单体,制备了新型的亲水作用毛细管整体柱,并通过三聚氰胺在此柱上的保留行为证明其具有亲水性.以加压毛细管电色谱(pCEC)技术为平台,优化了整体柱基于亲水作用分离分析奶制品中三聚氰胺的色谱条件.当流动相中乙腈与10 mmol/L 磷酸盐缓冲液的体积比为80:20,pH为3.0,电压为 3 kV,检测波长为215 nm时,三聚氰胺能获得很好的分离.方法学考察结果表明,合成的亲水整体柱具有良好的重现性和渗透性,建立的pCEC分析方法的检出限为0.05 mg/L.该方法简单方便,回收率较高,而且流动相中无需添加离子对试剂,适合于奶制品中三聚氰胺的定量测定.
关键词:
亲水作用毛细管整体柱
,
制备
,
加压毛细管电色谱
,
三聚氰胺
,
奶制品
高也
,
王彦
,
王超然
,
谷雪
,
阎超
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2011.12038
以N,N-二甲基-N-甲基丙烯酰胺基丙基-N,N-乙甲基-N-丙烷磺酸内盐(SPP)为单体,季戊四醇三丙烯酸酯(PETA)为交联剂,偶氮二异丁腈(AIBN)为引发剂及两类不同的致孔剂(乙醇/乙二醇和甲醇/1,4-丁二醇)制备了两种新型亲水性整体柱.为了获得理想的柱效、电渗流速度和渗透性,对制备整体柱的各反应物配比进行了研究和优化.比较了两种整体柱在渗透性和分离样品方面的性能,结果表明,以乙醇/乙二醇为致孔剂制备的整体柱在柱效、分离度方面优于以甲醇/1,4.丁二醇为致孔剂制备的整体柱,但在渗透性方面不及后者.探讨了流动相中盐浓度对核苷类样品保留的影响,发现当甲酸铵浓度从10 mmol/L增加到70 mmol/L时,核苷样品的保留因子呈现先增加后减小的状态.将制备的整体柱用于毛细管液相色谱和加压电色谱分别分离胺类、酚类和核苷类样品,获得了理想的分离效果.在分离酚类和核苷类混合样品时,发现加压毛细管电色谱在分离度和分离速度上均优于毛细管液相色谱.
关键词:
亲水整体柱
,
制备
,
毛细管液相色谱
,
加压毛细管电色谱
,
胺类化合物
,
酚类化合物
,
核苷类化合物
胡青红
,
王超然
,
李静
,
王彦
,
谷雪
,
阎超
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2012.12040
以4-乙烯基苯硼酸(VPBA)为功能单体,季戊四醇三丙烯酸酯(PETA)为交联剂,乙二醇和二甘醇为二元致孔剂,通过热引发自由基聚合反应,在毛细管内原位聚合制备得到一种poly(VPBA-co-PETA)毛细管整体柱.所制备的整体柱具有典型的硼酸亲和特性,可以特异性地捕获含有顺二羟基的化合物.在前期实验的基础上,将其用于两种中草药——蒲公英和刺果卫矛中含顺二羟基的小分子活性物质的富集.这两种中药提取物直接用高效液相色谱进行检测时,其活性成分绿原酸等因含量太低而使检测困难或无法检测;经过硼酸亲和整体柱富集后收集洗脱液进行检测,色谱峰响应则显著提高.该结果表明所制备的poly(VPBA-co-PETA)整体柱可以作为富集中药提取物中含顺二羟基活性物质的有效手段.
关键词:
硼酸亲和
,
整体柱
,
顺二羟基化合物
,
活性物质
,
中药
,
富集
赵卉
,
王玉红
,
刘芳
,
王彦
,
谷雪
,
阎超
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2012.12043
将微流蒸发光散射检测器(μELSD)与毛细管液相色谱(cLC)联用,应用于中药银杏叶提取物及其分散片制剂的分离检测领域.首先对μELSD仪器参数进行优化.通过调节漂移管温度与载气流量,提高了分析物的响应,并减小了噪声.然后,搭建了cLC-μELSD分离检测平台,其相对常规LC可大大减小实验试剂消耗.流动相A为0.05％(体积分数,下同)三氟乙酸(TFA)水溶液,流动相B为含0.05％ TFA的甲醇溶液.最优的洗脱梯度条件为:0 ～ 10 min,5％B ～ 25％ B; 10～25 min,25％B ～38％ B;25 ～35 min,38％B;35 ～ 40 min,38％B～42％ B;40～55min,42％B ～50％B.银杏叶提取物和复杂中药制剂银杏叶提取物分散片都得到了较好的分离,并在其中鉴定到紫外波段几乎无吸收的重要内酯类活性成分白果内酯以及银杏内酯A、B和C.测定了不同厂家银杏叶提取物中萜类内酯洗脱时间的相对标准偏差,结果均不大于2.42％,表明该体系在目标物的分析上具有良好的重现性.实验证明所建立的cLC-ELSD体系在复杂中药体系的分离检测中有良好的应用性.
关键词:
微流蒸发光散射检测器
,
毛细管液相色谱
,
银杏叶提取物
,
中药
况媛媛
,
王彦
,
谷雪
,
李静
,
阎超
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2013.11003
使用新型二元致孔剂聚乙二醇（PEG）/甲醇，以 N，N-二甲基-N-甲基丙烯酰胺基丙基-N，N-二甲基-N-丙烷磺酸内盐（SPP）为单体，季戊四醇三丙烯酸酯（PETA）为交联剂，偶氮二异丁腈（AIBN）为引发剂，通过原位聚合法制备磺酸甜菜碱型两性离子亲水毛细管整体柱。对各反应物的配比进行了优化。结果表明，当单体与致孔剂的质量比为1：2.5，并且致孔剂中 PEG 与甲醇的质量比为1：2，单体内部 SPP 与 PETA 的质量比为1：1，AIBN 为总质量的0.1％时为最优配比；PEG /甲醇二元致孔剂的加入实现了对整体柱内部孔径大小的调节，得到了结构更为均一，渗透性、机械稳定性良好的毛细管整体柱，并且理论塔板数与传统制备方法相比有显著提高，在毛细管液相色谱模式下最高可达2．4×105塔板/ m。将制备的整体柱应用于毛细管液相色谱和加压毛细管电色谱分离酚类、核苷类等极性小分子混合物，得到了很好的分离效果。
关键词:
二元致孔剂
,
磺酸甜菜碱
,
两性离子亲水整体柱
,
毛细管液相色谱
,
加压毛细管电色谱
鲁阳芳
,
汪慧
,
王桂明
,
王彦
,
谷雪
,
阎超
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2014.11030
制备了粒径为1μm的无孔C18固定相，并将其应用在手性加压毛细管电色谱中用以分离对映体。以改良的Stber法先合成粒径为1μm的无孔二氧化硅微球，后采用二次硅烷化方法制备出 1μm C18固定相。以加压毛细管电色谱为平台，通过考察影响分离的各因素，确定了最佳拆分条件：乙腈／5 mmol／L pH 4.0乙酸铵缓冲液（20／80，v／v），羧甲基-β-环糊精（CM-β-CD）浓度15 mmol／L，泵流速0.03 mL／min，分离比约300：1，施加电压2 kV。本研究采用的二次硅烷化方法提高了 C18的键合量。和毛细管液相色谱相比，4种药物在加压毛细管模式下有更好的分离效果，柱效最高为19万理论塔板数／m。盐酸安非他酮、盐酸克伦特罗、酒石酸美托洛尔、盐酸艾司洛尔对映体的分离度分别为1.55、2.82、1.69、1.70。该研究为手性流动相添加剂法在加压毛细管电色谱中的应用以及微米级填料在手性色谱中的应用提供了新的思路。
关键词:
1 μm无孔 C18固定相
,
二次硅烷化
,
手性加压毛细管电色谱
,
手性流动相添加剂
,
手性拆分
汪慧
,
薛芸
,
鲁阳芳
,
谷雪
,
王彦
,
阎超
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2014.12002
利用醛基和氨基之间的席夫碱反应在SiO2微球表面引入聚合物分子聚乙烯亚胺（ polyethyleneimine，PEI），以提高微球表面的氨基含量；然后利用自组装-化学镀法制备了 SiO2@ Au 核壳填料，并对制备过程中反应溶液的pH值和甲醛用量进行了优化。场发射扫描电子显微镜表征结果显示，经过条件优化后制备的 SiO2@Au 核壳颗粒的表面 Au包覆量较高，且包覆均匀、分散性较好。最后将谷胱甘肽（ glutathione，GSH）分子修饰在 SiO2@ Au 表面，条件优化后成功地制备了一种新型的两性离子型亲水色谱材料 SiO2@ Au-GSH，并将该填料填入毛细管中，制备了 SiO2@Au-GSH两性离子型毛细管亲水色谱柱，并在毛细管液相色谱和加压毛细管电色谱系统中考察了色谱柱的亲水性能，研究证明 SiO2@Au-GSH毛细管柱具有较好的分离能力和亲水性质。
关键词:
聚乙烯亚胺
,
SiO2Au核壳填料
,
谷胱甘肽
,
毛细管亲水色谱柱
,
毛细管液相色谱
,
加压毛细管电色谱
