张维平
,
郭鸿
,
高娟
,
耿信笃
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2000.06.001
以溶质计量置换保留模型(SDM-R)为依据,通过研究3种正链醇同系物溶剂置换剂对14种正链醇同系物溶质色谱保留行为的影响,发现计量置换参数Z(对应1mol溶质被吸附时从溶质与固定相接触处释放出的溶剂的总摩尔数)、lgI(与1mol溶质对固定相亲和势有关的常数)和j(与1mol溶剂对固定相亲和势有关的常数)均随着同系物置换剂相对分子质量的增大而减小,并呈现出线性变化,表明溶剂强度与溶剂分子的大小有关,分子愈大,溶剂洗脱能力愈强,并遵循同系物规律.此外,还得出了j作为溶剂强度参数最为可靠及准确的结论,从一个新的角度揭示了液相色谱中同系物规律.与Snyder经验公式中对应的3个参数比较,发现那3个参数的这种规律展示得不明显.
关键词:
反相高效液相色谱
,
计量置换保留模型
,
同系物
,
置换剂
,
保留机理
张养军
,
申烨华
,
张启东
,
耿信笃
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2000.06.003
提出了以醋酸-水作为流动相的体系中,在ODS柱上分离生物大分子的反相高效液相色谱(RPLC)方法.实验结果表明,醋酸-水的洗脱能力强于甲醇-水-三氟醋酸体系,在一定程度上克服了色谱分离中一些蛋白质的不可逆吸附且具有便于冷冻干燥的优点.用参数Z(1mol溶剂化溶质被溶剂化固定相吸附时从两者接触表面释放出置换剂的摩尔总数,logI(与1mol溶质对固定相亲和势有关的常数)和j(与1mol溶剂对固定相亲和势有关的常数)对9种蛋白质在此流动相体系中的保留进行了表征.该流动相使在RPLC中用于分离生物大分子的三元流动相体系成为二元流动相体系,更适合于理论研究.同时得出结论:在醋酸-水体系中,蛋白质与固定相之间的作用力主要为非选择性作用力;蛋白质在醋酸-水和甲醇-水-三氟醋酸两种流动相体系中的分子构象变化不同.
关键词:
反相高效液相色谱法
,
计量置换
,
生物大分子
郭鸿
,
张养军
,
高娟
,
耿信笃
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2001.01.001
比较了Snyder经验公式中的K0w与S和溶质计量置换保留模型（SDM-R）中溶质保留参数Z（1mol溶剂化溶质被溶剂化固定相吸附时，在其接触表面处释放出溶剂或置换剂的总摩尔数）与lgI（与1mol溶质对固定相的亲和势有关的常数）之间的定量关系。SDM-R中的两个参数间不仅对同系物溶质可以有很好的线性关系，而且对非同系物溶质也有很好的线性关系。其线性关系的好坏主要取决于这两个参数数值范围的大小，与文献中报告的线性关系取决于是否单因素影响溶质的保留和完全由统计学规律决定的结论不同。与Snyder经验公式中相对应的参数进行了比较，SDM-R保留参数的线性范围比Snyder公式中参数的线性范围宽。
关键词:
反相高效液相色谱
,
溶质保留参数
,
溶质计量置换保留模型
,
同系物
,
非同系物
赵建国
,
姚丛
,
卫引茂
,
耿信笃
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2001.06.001
首次研究了疏水作用色谱(HIC)中芳香醇同系物在不同种类盐流动相中的保留行为.以计量置换保留模型中的参数Z分析了HIC中小分子与生物大分子保留行为的差别,以及不同流动相组成对两种类型溶质的洗脱范围及洗脱能力的影响.与反相色谱相似,芳香醇在HIC中的保留仍存在同系物规律.比较了小分子和生物大分子在不同盐溶液中的Z值变化,表明流动相中的盐仅改变小分子与固定相的水合程度,而对生物大分子,除改变其和固定相水合程度外,还会影响生物大分子与固定相接触区的分子构象.
关键词:
疏水作用色谱
,
芳香醇同系物
,
生物大分子
,
保留
王彦
,
耿信笃
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2002.06.001
以计量置换吸附理论(SDT-A)为基础,从理论上推导出计量吸附模型中表征溶质对固定相亲合势大小的参数βa值与流动相中强置换剂浓度的对数呈线性关系.计量置换模型中的参数n和q (n和q分别代表1摩尔溶剂化溶质被吸附时,从吸附剂表面和从溶质分子表面所释放出的溶剂的物质的量)是计量置换参数Z值的分量, 是两个非常有用的参数,可以从这个定量关系中直接获得.推导出的方程用苯的衍生物进行了实验验证, 获得了较满意的结果.将这种方法计算得到的分量值与SDT-A与计量置换保留模型(SDT-R)相结合的方法得到的分量值进行了比较, 发现两种方法所得到的分量值符合较好,且n和q都遵循同系物碳数规律.同时也发现当溶质在液-固表面吸附时,从吸附剂上释放出的溶剂分子要比从溶质表面释放出的溶剂分子多(n＞q).
关键词:
计量置换理论
,
吸附亲合势
,
计量置换参数的分量
,
体相组成
,
同系物规律
李敏
,
王彦
,
龚波林
,
耿信笃
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2003.03.006
以溶菌酶(Lys)为目标蛋白,用计量置换保留理论(SDT-R)中的参数Z和logI对弱阳离子交换色谱(WCX)中"准天然态"和脲变还原与非还原的两种变性状态的Lys的分子构象变化进行了表征.发现在流动相中含有脲时,蛋白的保留仍服从SDT理论,可以准确测定在特定脲浓度条件下Lys的Z及logI值.结果表明,3种分子构象状态的Lys的Z值均随脲浓度改变呈现不连续变化;"准天然态"Lys在同一脲浓度条件下的Z值比变性状态的大,logI比变性状态的小,而非还原变性态和"准天然态"Lys的Z和logI值比较接近.还对不同脲浓度条件下Lys的活性回收率与Z值之间的关系进行了研究.
关键词:
弱阳离子交换色谱
,
溶菌酶
,
分子构象
,
蛋白复性
,
表征
