孙凯博
,
尚志
,
孙妍
,
乔智
,
刘莎
,
樊柳荫
,
曹成喜
,
肖华
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2016.08038
唾液中的糖蛋白丰度偏低,给分离、分析带来挑战.该文采用麦胚素(WGA)和橙黄网胞盘菌凝集素(AAL)分别富集糖蛋白,考察了高丰度蛋白质去除和不同酶解方式对糖蛋白分离、分析的影响.结果显示,WGA和AAL提取的唾液糖蛋白经胶内酶解可鉴定到的糖蛋白数量显著多于溶液内酶解的结果,也优于去除高丰度蛋白质后的鉴定结果.选择WGA结合胶内酶解进一步对比分析肺癌患者与健康人唾液糖蛋白的差异,通过免标记定量分析共鉴定到139个蛋白质,其中102个蛋白质存在糖基化位点,包括14个在癌症组和正常组之间存在显著差异(p＜0.05)的糖蛋白,表明该策略可用于唾液糖蛋白的有效分离、分析和癌症标志物的发现.
关键词:
凝集素
,
糖蛋白
,
唾液
,
标志物
王星
,
张薇
,
樊柳荫
,
曹成喜
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2007.05.015
采用建立在移动反应界面理论上的体系进行尿样中氧化苦参碱的富集与定量检测.与传统的毛细管电泳相比,体系中引入了富集缓冲溶液(富集相)和分离缓冲溶液(分离相).优化的条件如下:样品缓冲溶液为20 mmol/L 甲酸钠(用氨水调节pH至10.70),富集缓冲溶液为40 mmol/L 甲酸-甲酸钠(pH 2.60),分离缓冲溶液为100 mmol/L 甲酸-甲酸钠(pH 4.80);样品相压力进样1.4 kPa×3 min,富集相压力进样1.4 kPa×7 min,紫外检测波长210 nm,电压21 kV.氧化苦参碱在2.2～65 mg/L的质量浓度范围内呈良好的线性关系(r=0.999 1),检出限为0.74 mg/L,灵敏度比常规毛细管电泳方法提高约70倍,重现性良好.该方法已经成功地应用于尿样中氧化苦参碱的检测.
关键词:
毛细管电泳
,
移动反应界面
,
氧化苦参碱
,
富集
,
尿样
陈建锋
,
张薇
,
樊柳荫
,
任吉存
,
曹成喜
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2007.06.039
锌离子在胰岛素中扮演着非常重要的角色,这是因为通过金属离子与蛋白质之间的相互作用,使得胰岛素的结构发生变化并影响胰岛素的生物功能.因此,去锌胰岛素在金属和蛋白识别以及结构研究中是必需的.该文采用乙二胺四乙酸(EDTA)二钠盐与锌离子进行配合作用形成稳定的[Zn-EDTA]2-配合物来去除胰岛素中的锌离子,然后用Sephadex G-25柱对体系进行凝胶过滤,以除去胰岛素中的配合物和原有的苯酚,并用电喷雾离子化质谱对分离的物质进行鉴定.结果显示除去锌离子的胰岛素与EDTA配合物的分离效果良好.采用原子吸收光谱来检验胰岛素馏分中锌离子的去除效果,结果显示94.3%的锌离子被去除,表明EDTA配合锌离子的效果显著.所有结果均表明该方法可用来制备去锌牛胰岛素.
关键词:
凝胶色谱(gel chromatography)
,
电喷雾离子化质谱(ESI-MS)
,
原子吸收光谱(AAS)
,
乙二胺四乙酸(EDTA)
,
去锌胰岛素(zinc-free insulin)
,
制备(preparation)
,
鉴定(identification)
吴进
,
樊柳荫
,
张薇
,
王秋玲
,
曹成喜
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2008.05.019
快速灵敏的尿液指纹图谱分析对于临床诊断中发现新的生物标记至关重要.该文建立了一种简便、快速、灵敏的移动反应界面(MRB)介导的富集技术进行毛细管电泳尿液指纹图谱分析.MRB由25 mmol/L甘氨酸(Gly)-HCI(pH 2.5)作为样品缓冲液和50 mmol/L Gly-NaOH(pH 12.3)作为电泳缓冲液形成.与常规的毛细管区带电泳只能观察到尿液中不到10个峰相比,采用MRB可以观察到超过80个峰并将检测灵敏度提高了至少十几倍,显示该方法对于代谢组学分析具有重要的意义.
关键词:
毛细管区带电泳
,
移动反应界面
,
富集
,
指纹
,
尿液
范银苹
,
李杉
,
樊柳荫
,
曹成喜
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2012.04003
建立了一种可视化的、利用移动中和界面离线富集-毛细管电泳检测电镀水中痕量重金属离子的新方法.在该富集系统中,阳极电解液为2.1 mmol/L HCl-98 mmol/L KCl-痕量重金属离子,阴极电解液为4.0 mmol/LNaOH-96 mmol/L KCl,界面向阴极移动,分离电压为180 V,阴极电解液和阳极电解液的流速均为1 mL/min.富集后凝胶中的金属离子浓度用毛细管电泳检测,标准曲线在实验浓度范围内均有良好的线性关系(r≥0.998 5),预富集倍数达80 ～150倍,Cu(Ⅱ)、Zn(Ⅱ)、Ni(Ⅱ)、Mg(Ⅱ)、Ca(Ⅱ)、Cr(Ⅲ)和Fe(Ⅲ)的检出限分别为0.163、0.256、0.077、0.153、0.203、0.062和0.142 mg/L,均明显低于国家规定标准；日内和日间精密度均小于7.42％.所建方法已成功用于实际电镀废水样品中痕量重金属离子的富集和检测.
关键词:
毛细管区带电泳
,
移动中和界面
,
样品富集
,
痕量分析
,
重金属离子
,
电镀废水
郭成叶
,
王后禹
,
张雷
,
樊柳荫
,
曹成喜
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2013.04040
利用移动反应界面滴定(moving reaction boundary titration,MRBT)技术可视化快速准确测定豆浆中的总蛋白质含量.在MRBT中,移动反应界面(moving reaction boundary,MRB)是由阴极液中的氢氧根离子和固定在聚丙烯酰胺凝胶(polyacrylamide gel,PAG)中的豆浆蛋白质分子形成,通过酸碱指示剂来指示MRB的移动.利用MRB移动速度(VMRB)与蛋白质浓度存在的函数关系建立标准曲线.配对t检验MRBT测定结果与凯氏定氮相比在95％的置信区间内无显著性差异.MRBT测定所需时间为10 min左右,线性范围为2.0 ～14.0 g/L,检出限为0.05 g/L,日内相对标准偏差小于1.90％,日间相对标准偏差小于4.39％,回收率为97.41％ ～99.91％.此外,三聚氰胺等非蛋白质氮(non-protein nitrogen,NPN)的添加,对豆浆中蛋白质的测定结果影响较小.
关键词:
移动反应界面
,
电泳
,
滴定
,
总蛋白质含量
,
豆浆
和雨晨#
,
吴雪静#
,
孔凡志
,
曹成喜
,
樊柳荫
,
肖华
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2016.03003
电解质电导率的测定具有操作简单和精确度高等优点，若用于离子淌度的研究将会是准确、简便且廉价的手段。该研究基于电解质电导率提出了新理论方法。以单价离子为研究对象，在不高于0.05 mol／L 离子强度下，根据19种单价电解质的电导率数据，将最大偏差接近10％的经验方程修正为最大偏差为5％的精确等式。校正公式的预测值也与移动界面法测定的盐离子淌度和露西方程得到的32种有机离子淌度有很高的一致性。研究还表明19种无机离子与32种有机离子的电解电导率与电泳淌度高度一致。本文还给出了小于0.02 mol／L 离子强度下更加准确的方程（最大偏差2％），暗示改进后的经验公式具有极高的精确度。不仅如此，文献中的大量电解质电导率数据均可用于离子淌度的研究，且测定电解质电导率的简便性使得相关研究的深入更加容易。
关键词:
经验方程
,
电解质电导
,
离子淌度
,
离子强度
,
毛细管电泳
吴雪静
,
金杰
,
颜炜
,
肖华
,
樊柳荫
,
曹成喜
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2016.04029
在甲酸（α相）和氢氧化钠（γ相）缓冲液形成的移动反应界面的基础上，提出了一种衍生移动反应界面模型。模型表明在α相和γ相之间会形成一个新的β相，β相和α相形成衍生移动反应界面，β相和γ相形成移动界面。为了验证该模型的有效性，该文给出了相关理论及数值推导过程。此外，基于毛细管电泳和自制装置进行了相关实验。结果表明，若使用以前的移动反应界面，实验结果与理论计算存在较大误差，而采用该文提出的衍生移动反应界面，实验数据与理论计算结果高度一致。该文提出的衍生移动反应界面理论及模型对于电泳，特别是毛细管电泳中样品的分离与富集具有重要的意义。
关键词:
电迁移
,
电泳
,
数值计算
,
移动反应界面
,
堆积
朱德锐
,
龙启福
,
沈国平
,
李丹丹
,
刘德立
环境化学
doi:10.7524/j.issn.0254-6108.2015.01.2014041201
以青海湖野生菌株Halomonas ventosae QHL5为材料，初步探讨了多种因素对胞内相容溶质四氢嘧啶（ Ectoine）合成的影响．通过设置OSM培养基（ Oesterhelt?Stoeckenius medium）的不同单因素诱导条件（ Na＋、K＋、Mg2＋、pH和温度等），培养 QHL5菌株，并采用80％乙醇抽提 QHL5胞内四氢嘧啶，进行高效液相色谱（HPLC）定量检测．结果表明，QHL5胞内四氢嘧啶积聚的最佳单因素培养条件为Na＋浓度为1．5 mol·L－1，K＋浓度为0．75 mol·L－1，Mg2＋浓度为0．2 mol·L－1，pH 8．0和35℃．在优化条件下，QHL5积聚的四氢嘧啶最大浓度为379．6±8．26 mg·L－1，达到167．1±3．64 mg·g－1细胞干重． QHL5胞内的四氢嘧啶合成受到Na＋的渗透刺激作用，生物量却受到高浓度Na＋的抑制，低浓度Mg2＋（0．1—0．6 mol·L－1）和中浓度的K＋（0．5—1．2 mol·L－1）对四氢嘧啶的生物合成具有重要的渗透刺激作用．与已报道的四氢嘧啶合成菌株相比，QHL5能合成单一的、高浓度的四氢嘧啶，具备潜在的商业制备和应用开发价值．
关键词:
青海湖
,
Halomonas ventosae
,
相溶物质
,
四氢嘧啶
,
影响因素
